本發(fā)明涉及大腸桿菌外膜蛋白TolC核酸適配體的序列及用途。本發(fā)明采用基因重組質(zhì)粒表達(dá)大腸桿菌表面蛋白TolC，通過SELEX過程篩選與其特異性結(jié)合的核酸適配體群，測序分析適配體群的堿基序列。該序列可作為大腸桿菌表面蛋白TolC的特異性結(jié)合的探針，用于設(shè)計和制備大腸桿菌快速檢測標(biāo)識物及外排泵抑制劑等。

1.特異結(jié)合大腸桿菌外膜蛋白TolC的核酸適配體，所述核酸適配體如SEQ ID NO：4所
示序列。
2.按權(quán)利要求1所述的適配體，其特征在于，所述大腸桿菌外膜蛋白TolC采用如下方
法純化得到：
采用分子克隆技術(shù)，根據(jù)大腸桿菌外膜蛋白TolC的基因組序列設(shè)計特異引物，所述特
異引物之上游引物Pa為5’-CGGGATCCATGAAGAAATTGCTCCCCATTCTT‐3’，其下游引物Pb為5’
‐CCGCTCGAGGTTACGGAAAGGGTTATGACCGTT‐3’，以全長cDNA為模板，PCR擴增，得到目的基
因經(jīng)Bam H I和Xho I雙酶切，同樣處理PET-30a質(zhì)粒，再用T4連接酶連接制得含有TolC
基因的重組質(zhì)粒；重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞BL21，從轉(zhuǎn)化的平板挑單克隆到液體培養(yǎng)基中培
養(yǎng)，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，經(jīng)固液分離，取沉淀經(jīng)超聲粉碎，然后電泳；再采用柱層析純化所述大
腸桿菌外膜蛋白TolC。
3.按權(quán)利要求1或2所述的適配體，其特征在于，所述序列為人工合成的序列，或任何
其他來源的同樣的序列。
4.一種權(quán)利要求1-3中任一項所述的適配體在制備檢測TolC蛋白的探針中的應(yīng)用。