本發明涉一種分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，利用大腸菌群在37℃可以發酵乳糖產酸、產氣特性，以自制培養基為主，其中添加指示劑溴甲酚紫和TTC溶液，大腸菌群發酵培養后不僅能生產紅色沉淀，而且可使培養液發生了由紫色變為黃色的顏色變化，利用該發酵液顏色的變化程度與溶液中所含大腸菌群數量成正相關的特性，可得出待檢樣品液中大腸菌群的含量。本發明方法相比于現行國標方法，在檢測時間上有了大幅縮減，在加樣后培養60min?400min即可檢測樣品中的大腸菌群數值，試用范圍較廣，滿足了眾多檢測領域要求檢測時間短的需求，在未來快速檢測領域會有較好的應用前景。

1.一種分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，其特征在于：步驟如下：
⑴溶液配制：
乳糖發酵檢測培養液：50-90μL2％(質量濃度)溴甲酚紫溶液、4g胰蛋白胨、0.5g乳糖、
0.5gD-甘露醇、0.75gNaCl、0.02g十二醇硫酸鈉、0.01g脫氧膽酸鈉、100mL蒸餾水，pH6.8-
7.2，115℃，15min滅菌后待用；
TTC溶液：TTC加入無菌水制成0.5-3％(質量濃度)溶液，避光保存、待用；
⑵檢測過程：
①樣品勻液的制備：
無菌操作取待檢樣品，8000r/min～10000r/min均質1min～2min，制成體積比為1:10的
樣品勻液，或質量：體積(g：L)為1:10的樣品勻液；
②過濾：
用中速定量濾紙過濾樣品勻液，得濾液；按濾液：濃縮的待檢液的體積比為5-10：1的比
例用膜過濾器過濾濾液，得濃縮的待檢液；取濃縮的待檢液按體積比為1：5-10的比例加入
含有乳糖發酵檢測培養液中，同時，按濃縮的待檢液：TTC溶液的體積比mL：μL為1：30-80的
比例取TTC溶液到乳糖發酵檢測培養液中，置于37℃培養；
③標準曲線的繪制：
培養60-400min后，檢測培養基中有顏色變化并伴有紅色沉底物質生產，取檢測管中的
培養液，經離心處理發酵液，5000-7000r/min離心，離心2min-5min，取上清液置于石英比色
皿中用分光光度計進行檢測，測量360nm—500nm特殊納米處的吸光值，建立不同含量大腸
菌群混合培養液顏色和大腸菌群含量之間的對應線性關系，繪制標準曲線；
④待檢樣品的檢測：
檢測樣品時，按步驟①-③的方法進行處理和培養待檢樣品，培養液有變色和沉淀現
象，按前述步驟將培養液離心后，取上清液在360nm—500nm處測定吸光值，記錄數據，與③
中標準曲線進行比對，根據對比結果確定未知樣品中所含大腸菌群數，最終得出待檢樣品
中所含大腸菌群數值。
2.根據權利要求1所述的分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，其特征在于：所述步驟
⑵③中標準曲線的回歸方程為：
lgY＝14.89X-1.33
R²＝0.991
公式中：Y：未知樣品中大腸菌群的預計含量
X:360nm—500nm處的OD值
R：相關系數。
3.如權利要求1或2所述的分光光度法快速檢測大腸菌群的方法在水質監測、生物、食
品、衛生方面的大腸菌群的快速檢測方面中的應用。