本發明公開了一種鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白及制備方法與應用，屬于生物工程領域。本發明的鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；然后利用基因工程技術，在其進行克隆的基礎上，將其與原核表達載體pET?32a(+)連接，成功轉化大腸桿菌BL21(DE3)表達系統進行誘導、表達的基因工程產品；該蛋白的表達形式是OmpHM/His融合蛋白，表達的融合蛋白分子量為28kDa，將產品設計為融合表達主要是考慮便于純化；同時表達蛋白保持蛋白的天然活性。產品可應用于檢測鴨疫里默氏桿菌抗體的間接ELISA方法的檢測抗原，也可作為預防鴨疫里默氏桿菌的基因工程亞單位疫苗。

1.鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白應用于作為檢測鴨疫里默氏桿菌抗體的間接
ELISA方法的檢測抗原，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的氨基酸序列
如SEQ ID NO:1所示。
2.權利要求1所述的應用，其特征在于：鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的DNA序列
如SEQ ID NO:2所示。
3.權利要求1所述的應用，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的制備
方法具體包括以下步驟：
A、以鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer）基因組DNA為模板，采用核苷酸序
列分別如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的上、下游引物PCR擴增得到鴨疫里默氏桿菌
OmpH截段基因片段，與T-Vector pMD19(simple)連接，得pMD19-OmpHM；
B、用限制性內切酶BamH I和Xho I分別雙酶切pMD19-OmpHM質粒和原核表達載體
pET32a(+)，進行連接，得重組原核表達質粒pET32a-OmpHM；
C、將步驟B提取的重組質粒pET32a-OmpHM轉化到表達宿主菌誘導表達，得鴨疫里默氏
桿菌截段重組蛋白粗品。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：將步驟C所得鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重
組蛋白粗品經鎳瓊脂糖凝膠親和層析純化后，用100mM咪唑洗脫，得鴨疫里默氏桿菌OmpH截
段重組蛋白。
5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：步驟C中的宿主菌為菌株BL21(DE3)，在
IPTG濃度=1.2mmol/L，誘導溫度為25℃條件下進行誘導表達9小時，得鴨疫里默氏桿菌OmpH
截段重組蛋白。
6.鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白應用于作為預防鴨疫里默氏桿菌的基因工程亞
單位疫苗，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的氨基酸序列如SEQ ID
NO:1所示。