本發明公開了一種檢測結核分枝桿菌方法及其專用引物。本發明提供了一種輔助檢測結核桿菌的引物對，所述引物對的一條引物的核苷酸序列為序列表中的序列1，所述引物對的另一條引物的核苷酸為序列表中的序列2。本發明的實驗證明，使用本發明的特異性引物進行新的MDA-PCR兩步法，利用MDA全基因組恒溫擴增技術對痰液中結核分枝桿菌核酸進行富集，通過特異性引物結合PCR技術，檢測結核分枝桿菌，其具有以下優點：耗時短、敏感性高、準確性高。