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綠豆抗豆象基因VrPGIP等位基因VrPGIP1-2及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-30
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710534645.7 
  • 技術(專利)名稱 綠豆抗豆象基因VrPGIP等位基因VrPGIP1-2及其應用 
  • 項目單位 中國農業科學院作物科學研究所
  • 發明人 陳紅霖,程須珍,王麗俠,王素華 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 趙洋慧
  • 發布時間 2022-01-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了綠豆抗豆象基因VrPGIP等位基因VrPGIP1?2及其應用。通過對綠豆抗豆象品種V2709的候選基因VrPGIP進行克隆和測序,與感豆象綠豆品種的VrPGIP序列進行比對,結果表明,V2709在VrPGIP的554bp處發生單堿基替換,由C變為G,這一堿基突變導致第185個氨基酸由脯氨酸變為精氨酸,從而引起VrPGIP蛋白功能的變化。這與已鑒定的VrPGIP基因的突變位置不同,表明這是VrPGIP的一個新等位基因,命名為VrPGIP1?2。本發明還成功開發出VrPGIP1?2的功能性分子標記,對綠豆抗豆象育種工作具有重要意義。
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  • 02

    說明書

    1.綠豆抗豆象基因VrPGIP等位基因VrPGIP1-2,其特征在于,基因VrPGIP1-2的序列如SEQ ID NO:1所示。2.表達盒、表達載體、克隆載體或工程菌,其包括包含如權利要求1中所示序列的核酸。3.權利要求1所述基因VrPGIP1-2在提高轉基因植物抗豆象能力中的應用,其中所述植物包括綠豆。4.一種轉基因植物的構建方法,其特征在于,利用基因工程手段,在目標植物中過表達權利要求1所述基因VrPGIP1-2,篩選陽性轉基因植株。5.與綠豆抗豆象性狀相關的SNP分子標記,其特征在于,所述分子標記包含一個SNP位點,其位于如SEQ ID NO:1所示基因VrPGIP1-2序列的554bp處,該堿基由C變為G,對應的性狀由綠豆感豆象變為綠豆抗豆象;用于擴增所述SNP分子標記的引物如下:上游引物F5'-TTTCCCAGCTCCCTAATC-3'下游引物R5'-TACTTCCGCCCTCCATCA-3'。6.用于鑒定綠豆抗豆象品種的PCR檢測試劑盒,其特征在于,其含有用于擴增權利要求5所述SNP分子標記的引物F和R。7.權利要求5所述SNP分子標記在綠豆分子標記輔助育種中的應用。8.權利要求5所述SNP分子標記在鑒定綠豆抗豆象品種中的應用。9.根據權利要求8所述的應用,其特征在于,包括以下步驟:1)提取待測綠豆的DNA;2)以DNA為模板,利用引物F和R進行PCR擴增反應;3)檢測PCR擴增產物。10.根據權利要求9所述的應用,其特征在于,PCR反應體系:40ng DNA,1×Taq酶緩沖液,1mmol L-1dNTPs,引物F、R各0.25μmol L-1,1UTaq DNA聚合酶,ddH2O補至10μl;其中,1×Taq酶緩沖液的組成如下:10mmolL-1 Tris-HCl,pH8.8;10mmol L-1KCl;10mmol L-1(NH4)2SO4;1.5mmol L-1 MgCl2;0.1%Triton X-100;反應程序:95℃預變性5min;95℃變性30s,55℃退火45s,72℃延伸45s,32~35個循環;最后72℃延伸5min。
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專利技術附圖

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