本發(fā)明公開(kāi)了一種達(dá)肝素鈉的生產(chǎn)方法，本發(fā)明使用肝素鈉粗品為原料，通過(guò)降解、還原、乙醇沉淀得到低分子肝素鈉粗品，相對(duì)于需要使用肝素鈉精品為原料，方法適用范圍更廣，更可以從源頭控制達(dá)肝素鈉精品的質(zhì)量。創(chuàng)新性的通過(guò)HPLC對(duì)層析前的低分子肝素鈉粗品的p測(cè)試其分子量及分布-根據(jù)公式計(jì)算出層析過(guò)程中濾液的收集，準(zhǔn)確定量到符合要求的低分子肝素鈉精品液，避免了昂貴的分子量截流過(guò)濾膜的使用。再通過(guò)氧化、除菌過(guò)濾、沉淀脫水實(shí)現(xiàn)了“一鍋煮”的工藝，在操作上實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)化，節(jié)省了時(shí)間和人力成本，該工藝在現(xiàn)有的技術(shù)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)出了一條新的制備達(dá)肝素鈉原料的方法，且在本公司實(shí)現(xiàn)了達(dá)肝素鈉的工業(yè)化生產(chǎn)。

1.一種達(dá)肝素鈉精品的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)肝素鈉粗品用純化水溶解，調(diào)節(jié)溶液pH至2.6-2.8，加入亞硝酸
鈉攪拌20min后調(diào)節(jié)溶液pH至9.5-10.0，得到降解液，向降解液中加入硼氫
化鈉攪拌≥15h，調(diào)節(jié)溶液pH至3.4-3.6攪拌20min，紫外燈照射降解液，調(diào)
節(jié)溶液pH至7.0-7.5后用乙醇沉淀脫水，真空干燥得到低分子肝素鈉粗品；所
述肝素鈉粗品和純化水投料比為每1.0kg肝素鈉粗品配9.2-9.5L純化水；所述
肝素鈉粗品和亞硝酸鈉的投料比為每100kg肝素鈉粗品配1.5-2.0kg亞硝酸鈉；
所述亞硝酸鈉和硼氫化鈉的投料比為每1.0kg亞硝酸鈉配0.35-0.42kg硼氫化
鈉；亞硝酸鈉反應(yīng)時(shí)體系溫度維持在15-30℃；步驟(1)中通過(guò)用淀粉-碘化
鉀試紙測(cè)試溶液來(lái)確定反應(yīng)是否結(jié)束，調(diào)節(jié)體系pH的溶液為：4mol/L鹽酸，
5mol/L氫氧化鈉；紫外燈照射波長(zhǎng)為254nm，加入溶液體積和乙醇體積之比
為1.0:0.65-0.75，沉淀出的低分子肝素粗品在生產(chǎn)上需要再用乙醇脫水三次，
第一次用的乙醇和投料的肝素鈉粗品的比為每3.0-5.0L乙醇配1.0kg投料的肝
素鈉粗品，第二次和第三次用的乙醇為前一次用量的50％，每次脫水間隔2h
以上；
(2)將上述低分子肝素鈉粗品用2％氯化鈉溶液溶解，使最終溶液體積
和低分子肝素鈉粗品重量的比為每7.0-8.5L溶液配1.0kg低分子肝素鈉粗品，
然后加入層析柱內(nèi)，以2％氯化鈉溶液勻速洗脫，流速約為一個(gè)柱床體積/2小
時(shí)，對(duì)層析后的洗脫液通過(guò)HPLC檢測(cè)分子量及分布，通過(guò)公式計(jì)算除去的大、
小分子百分比數(shù)及相對(duì)應(yīng)體積，收集符合要求的洗脫液并調(diào)節(jié)pH至7.0-7.5，
收集的中間洗脫液用其2倍體積的乙醇來(lái)沉淀，沉淀物再用乙醇來(lái)脫水三次，
第一次用的乙醇和投料的低分子肝素鈉粗品的比為每3.0-5.0L乙醇配1.0kg低
分子肝素鈉粗品，第二次和第三次用的乙醇為前一次用量的50％，每次脫水間
隔2h以上，真空干燥得到低分子肝素鈉精品；
(3)將分次層析出的低分子肝素鈉精品合并，測(cè)試其分子量及分布，如
果小分子部分有偏差，調(diào)節(jié)溶液pH至7.0-7.5，加入乙醇沉淀對(duì)小分子片段進(jìn)
行調(diào)節(jié)，使其達(dá)到符合要求，把合格的低分子肝素鈉精品加到13#氧化罐內(nèi)中，
加入純化水和氯化鈉，低分子肝素鈉精品和純化水之比為每1.0kg低分子肝素
鈉精品配8.5-10L純化水，氯化鈉和純化水之比為每0.8-1.5kg氯化鈉配100L
純化水；攪拌溶解；步驟(3)中如果合并后的低分子肝素鈉精品HPLC檢測(cè)
分子量及分布顯示分子量小于3000的小分子部分不滿足≤13.0％的要求，就將
合并的低分子肝素鈉精品再純化一遍，將其溶解在純化水中，低分子肝素鈉精
品和純化水投料比為每1.0kg低分子肝素鈉精品配8.5-10L純化水，調(diào)節(jié)
pH7.0-7.5，再用2倍體積的乙醇來(lái)沉淀，沉淀物再用乙醇來(lái)脫水三次，第一次
用的乙醇和投料的低分子肝素鈉精品的比為每3.0-5.0L乙醇配1.0kg低分子肝
素鈉精品，第二次和第三次用的乙醇為前一次用量的50％，每次脫水間隔2h
以上；
(4)調(diào)節(jié)低分子肝素鈉精品溶液pH至10.5-11.0，加入30％過(guò)氧化氫
氧化≥4-5h，后調(diào)節(jié)pH至7.9-8.1，加入無(wú)水亞硫酸鈉，攪拌30min過(guò)濾得到
達(dá)肝素鈉粗品溶液；30％過(guò)氧化氫和溶液體積之比為0.25-0.45：100，無(wú)水亞
硫酸鈉和過(guò)氧化氫之比為0.20-0.30kg無(wú)水亞硫酸鈉配1.0L過(guò)氧化氫；
(5)調(diào)節(jié)達(dá)肝素鈉粗品溶液pH5.6-5.8，使其通過(guò)0.45μm和0.2μm
濾膜除菌，除菌過(guò)濾后的達(dá)肝素鈉溶液收集在潔凈沉淀罐中；步驟(5)中需
要做0.2μm和0.45μm濾膜完整性試驗(yàn)，以確保生產(chǎn)中使用的濾膜能夠滿足除
菌過(guò)濾要求；
(6)除菌后的達(dá)肝素鈉溶液用2.0倍體積的乙醇沉淀，沉淀出的達(dá)肝
素精品用乙醇脫水三次，第一次用的乙醇和投料的低分子肝素鈉精品的比為每
3.0-5.0L乙醇配1.0kg低分子肝素鈉精品，第二次和第三次用的乙醇為前一次
用量的50％，每次脫水間隔2h以上；最后真空干燥得到精品達(dá)肝素鈉。