本發(fā)明涉及一種高純度大分子尿激酶的制備方法及其凍干粉，屬于生物化學(xué)工程技術(shù)領(lǐng)域。具體包括步驟：(1)制備尿激酶粗品；(2)制備尿激酶精品；(3)提純；所述步驟(3)中將步驟(2)得到的尿激酶精品溶解后，將尿激酶精品溶液加入陽離子交換層析柱進(jìn)行提純；將提純后的尿激酶進(jìn)行凍干即得到尿激酶凍干粉。所述陽離子交換層析柱中充填的填料為Capto S impAct、SP sepharose HP、source 30S中的一種。本發(fā)明選擇高分辨率離子交換層析，在保證純度和活性收率的前提下，大大降低了生產(chǎn)成本，使得高純度大分子量尿激酶的規(guī)模化生產(chǎn)成為可能。

1.一種尿激酶的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)制備尿激酶粗品；(2)制備尿激酶精品；(3)提純；所述步驟(3)中將步驟(2)得到的尿激酶精品溶解后，將尿激酶精品溶液加入陽離子交換層析柱中進(jìn)行提純，提純時(shí)，首先用平衡緩沖液進(jìn)行沖洗，再用洗脫緩沖液進(jìn)行洗脫；所述陽離子交換層析柱中充填的填料為Capto S impAct、SP sepharose HP、source30S中的一種。2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述平衡緩沖液選自：醋酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液和Tris-HCl緩沖液中的一種；且所述平衡緩沖液中含有150-500mM氯化鈉。3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述洗脫緩沖液為含有500-1000mM氯化鈉的醋酸鹽緩沖液。4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)中提純之前，調(diào)節(jié)尿激酶精品溶液的電導(dǎo)率為15-90ms/cm。5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)中提純之前，調(diào)節(jié)尿激酶精品溶液的pH為4.5-7.5。6.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)包括如下步驟：首先將新鮮男性尿液加入硅膠吸附，硅膠裝柱用自來水沖洗，氨水洗脫，收集洗脫液；然后將洗脫液加入固體硫酸銨中沉淀，過濾，收集濾渣，即為尿激酶粗品。7.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)包括如下步驟：將尿激酶粗品經(jīng)過溶解、過濾后，得尿激酶精品。