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原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基及其使用方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-27
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201910230522.3 
  • 技術(專利)名稱 原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基及其使用方法 
  • 項目單位 廣東先康達生物科技有限公司
  • 發明人 謝海濤,薛衛巍,鐘家煒,謝天仲,王斌 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 尤濘昕
  • 發布時間 2022-01-27  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基及其使用方法,原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基包括以下組分:α?MEM培養液、AMD3100、BMP?4、胰島素、FGF?2、IL?6和LIF。培養基中不加胎牛血清,從而避免了臨床應用中可能產生的免疫排斥反應,減少了病原微生物污染的風險;通過添加IL?3、IL?6、G?CSF和SCF等細胞因子可協同FL產生強烈的增殖效應同時抑制臍帶間充質干細胞的分化;通過添加EGF可協同FGF?2促進臍帶間充質干細胞增殖分化;通過加入BMP?4作為干細胞增殖分化的營養因子,能夠維持并調節臍帶間充質干細胞正常的增殖狀態。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基,其特征在于,包括以下組分:α-MEM培養液、AMD3100、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷和細胞因子組合,所述AMD3100的濃度為0.5-5μg/ml,所述BMP-4的濃度為0.01-0.1ng/ml;所述胰島素的濃度為10-20μg/ml;所述FGF-2的濃度為1-12ng/ml,所述IL-6的濃度為0.05-0.15μg/ml;所述LIF的濃度為0.01-0.1μg/ml,所述三七總皂苷濃度為5-15μg/ml,所述細胞因子組合包括IL-3、SCF、G-CSF、FL和EGF;所述IL-3、SCF、G-CSF、FL和EGF的濃度分別為:IL-3 10-20ng/ml;SCF 50-150ng/ml;G-CSF 1-100ng/ml;FL 1-50ng/ml;EGF 5-15ng/ml。2.根據權利要求1所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基還包括地塞米松、轉鐵蛋白中的一種或幾種。3.根據權利要求2所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基,其特征在于,所述地塞米松的濃度為0.1-0.5μg/ml;所述轉鐵蛋白的濃度為0.01-0.1μg/ml。4.根據權利要求1所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基,其特征在于,所述α-MEM培養液為一種無血清培養液。5.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結束。6.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結束。7.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結束。8.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM 培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到10天后停用。9.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF直到10天后停用,培養第5天加入FL直到15天后停用。10.如權利要求1至4任一項所述的原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基的使用方法,其特征在于,所述原代臍帶間充質干細胞的無血清培養基用于培養臍帶間充質干細胞,所述使用方法包括以下步驟:a、在α-MEM培養液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養液;b、在T75培養瓶中進行培養,每瓶8ml培養液,接種2ml華通氏膠的α-MEM培養液的懸液,密度為0.25g/ml,于37℃、5%CO2的全飽和濕度下培養;c、培養前加入IL-3、EGF、G-CSF直到10天后停用,培養第5天加入SCF、FL直到15天后停用。
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專利技術附圖

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