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支鏈α-葡聚糖及生成其的α-葡糖基轉移酶和它們的制造方法以及用途

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-09
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200880017583.1 
  • 技術(專利)名稱 支鏈α-葡聚糖及生成其的α-葡糖基轉移酶和它們的制造方法以及用途 
  • 項目單位 株式會社林原
  • 發明人 渡邊光,山本拓生,西本友之,津崎桂二,奧和之,茶圓博人,福田惠溫 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣合衛
  • 發布時間 2022-01-09  
  • 01

    項目簡介

    本發明通過提供一種支鏈α-葡聚糖和生成該支鏈α-葡聚糖的新型的α-葡糖基轉移酶、它們的制造方法以及用途來解決上述課題,所述支鏈α-葡聚糖以葡萄糖為構成糖,其特征在于,在甲基化分析中,具有下述特征:(1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1∶0.6~1∶4的范圍;(2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的總計占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60%以上;(3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上且小于10%;及(4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種支鏈α-葡聚糖,其由來自保藏于獨立行政法人產業技術綜合
    研究所專利生物保藏中心,保藏編號為FERM?BP-10771的環狀芽孢桿菌
    (Bacillus?circulans)PP710、或保藏于獨立行政法人產業技術綜合研究
    所專利生物保藏中心,保藏編號為FERMBP-10770的球形節桿菌
    (Arthrobacter?globiformis)PP349的α-葡聚糖轉移酶作用于麥芽糖和/
    或葡萄糖聚合度為3以上的α-1,4-葡聚糖而得到、且所述支鏈α-葡聚糖
    以葡萄糖為構成糖,其特征在于,在甲基化分析中,具有下述特征:
    (1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基
    -1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6~1:4的范圍;
    (2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基
    -1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的總計占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60%以
    上;
    (3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇
    乙酸酯的0.5%以上且小于10%;及
    (4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇
    乙酸酯的0.5%以上。
    2.如權利要求1所述的支鏈α-葡聚糖,其特征在于,葡萄糖聚合度
    為10以上,重均分子量(Mw)除以數均分子量(Mn)所得的值(Mw/Mn)小于
    20。
    3.如權利要求1所述的支鏈α-葡聚糖,其特征在于,在通過分類號
    為EC3.2.1.94的異麥芽糖糊精酶消化所述支鏈α-葡聚糖時,每單位消
    化物的固體成分生成異麥芽糖25質量%以上50質量%以下。
    4.如權利要求1所述的支鏈α-葡聚糖,其特征在于,利用高效液相
    色譜法求出的水溶性食物纖維含量為40質量%以上。
    5.一種α-葡糖基轉移酶,其特征在于,具有通過與麥芽糖及葡萄糖
    聚合度為3以上的α-1,4葡聚糖作用并進行α-葡糖基轉移而生成權利要
    求1~4中任一項所述的支鏈α-葡聚糖,且通過培養保藏于獨立行政法人
    產業技術綜合研究所專利生物保藏中心,保藏編號為FERM?BP-10771的環
    狀芽孢桿菌(Bacil?lus?circulans)PP710、或保藏于獨立行政法人產業技
    術綜合研究所專利生物保藏中心,保藏編號為FERM?BP-10770的球形節桿
    菌(Arthrobacter?globiformi?s)PP349獲得,所述的α-葡糖基轉移酶且
    具有下述理化性質:
    (1)分子量
    在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中,為90,000±10,000道爾頓;
    (2)最適溫度
    在pH6.0反應30分鐘的條件下,為50~55℃;
    (3)最適pH
    在40℃反應30分鐘的條件下,為5.0~6.3;
    (4)溫度穩定性
    在pH6.0保持60分鐘的條件下,直到40℃穩定;及
    (5)pH穩定性
    在4℃保持24小時的條件下,至少在pH4.0~8.0內穩定。
    6.一種α-葡糖基轉移酶的制造方法,其特征在于,從培養具有權利
    要求5所述的α-葡糖基轉移酶的產生能力的微生物而得到的培養物提取
    α-葡糖基轉移酶。
    7.一種微生物,具有權利要求5所述的α-葡糖基轉移酶產生能力,
    其特征在于,為環狀芽孢桿菌(Bacillus?circulans)PP710,其保藏于獨
    立行政法人產業技術綜合研究所專利生物保藏中心,保藏編號為FERM?
    BP-10771;或球形節桿菌(Arthrobacter?globiformis)PP349,其保藏于
    獨立行政法人產業技術綜合研究所專利生物保藏中心,保藏編號為FERM?
    BP-10770。
    8.一種權利要求1~4中任一項所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,
    其特征在于,包含下述步驟:使權利要求5所述的α-葡糖基轉移酶與麥
    芽糖和/或葡萄糖聚合度為3以上的α-1,4葡聚糖作用,生成權利要求1~
    4中任一項所述的葡聚糖的步驟;提取其的步驟。
    9.如權利要求8所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,其特征在于,在
    生成權利要求1~4中任一項所述的葡聚糖的步驟中,并用選自淀粉酶、
    淀粉去分支酶及環糊精葡萄糖轉位酶中的1種或2種以上。
    10.如權利要求9所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,其特征在于,
    淀粉酶具有下述理化性質:
    (1)作用
    在水解淀粉的同時,催化葡糖基的轉移,并生成環糊精,水解普魯蘭
    多糖,生成潘糖;
    (2)分子量
    在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中,為58,000±10,000道爾頓;
    (3)最適溫度
    在pH6.0反應30分鐘的條件下,為55℃;
    (4)最適pH
    在35℃反應30分鐘的條件下,為6~7;
    (4)溫度穩定性
    在pH6.0保持60分鐘的條件下,直到40℃穩定,
    在pH6.0、1mM?Ca2+存在下,直到50℃穩定;及
    (6)pH穩定性
    在4℃保持24小時的條件下,至少在pH6.0~8.0的范圍內穩定。
    11.如權利要求9或10所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,其特征在
    于,淀粉酶來自屬于芽孢桿菌屬的微生物。
    12.如權利要求11所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,其特征在于,
    芽孢桿菌屬微生物為環狀芽孢桿菌(Bacillus?circulans)PP710,其保藏
    于獨立行政法人產業技術綜合研究所專利生物保藏中心,保藏編號為
    FERM?BP-10771。
    13.一種權利要求1~4中任一項所述的支鏈α-葡聚糖的制造方法,
    其特征在于,包含下述步驟:使用含有麥芽糖和/或葡萄糖聚合度為3以
    上的α-1,4葡聚糖的營養培養基培養具有權利要求5所述的α-葡糖基轉
    移酶產生能力的微生物的步驟;提取培養液中生成的權利要求1~4中任
    一項所述的支鏈α-葡聚糖的步驟。
    14.一種組合物,其特征在于,含有權利要求1~4中任一項所述的
    支鏈α-葡聚糖。
    15.如權利要求14所述的組合物,其特征在于,為飲食品、化妝品、
    醫藥品或工業原料。
    16.一種血糖上升抑制劑,其特征在于,含有權利要求1~4中任一
    項所述的支鏈α-葡聚糖作為有效成分。
    17.一種生物體內類脂質減少劑,其特征在于,含有權利要求1~4
    中任一項所述的支鏈α-葡聚糖作為有效成分。
    18.一種麥芽糖和/或葡萄糖聚合度為3以上的α-1,4葡聚糖的改性
    方法,其特征在于,使權利要求5所述的α-葡糖基轉移酶作用。
    19.一種異麥芽糖或含有其的糖質的制造方法,其特征在于,包含下
    述步驟:與權利要求5所述的α-葡糖基轉移酶一同,使異麥芽糖糊精酶與
    麥芽糖和/或葡萄糖聚合度為3以上的α-1,4葡聚糖作用,生成異麥芽糖的
    步驟;回收得到的異麥芽糖或含有其的糖質的步驟。
    展開

專利技術附圖

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