本發(fā)明公開了一種用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球及其制備方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明用親水性更強的SiO對超順磁性的FeO納米粒子進行完全包覆，然后用反相懸浮聚合技術(shù)制備以FeO納米粒子為核和表面含有環(huán)氧基團的聚合物為殼的核殼式的超順磁性聚合物微球。將上述核殼式超順磁性聚合物微球可用于青霉素酰化酶、葡萄糖異構(gòu)酶、葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶、胰蛋白酶或淀粉酶等水溶性生物酶的固定化，特別適用于青霉素酰化酶的固定化，得到的固定化酶活性為430U/g(濕酶)，經(jīng)過10次循環(huán)使用后，固定化酶保留了99％的初始活性。

1.一種用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，其特征在于，用親
水性更強的SiO₂對超順磁性的Fe₃O₄納米粒子進行完全包覆，然后用反相懸浮聚合技術(shù)制備
以Fe₃O₄納米粒子為核和表面含有環(huán)氧基團的聚合物為殼的核殼式的超順磁性聚合物微球；
所述的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，具體包括如下步驟：
將氯化鐵和硫酸亞鐵溶于去離子水中，在N₂保護下加熱至一定溫度后用氨水調(diào)節(jié)體系
pH值為10～11，繼續(xù)熟化1～3h，冷卻至室溫，用去離子水反復洗滌沉淀至中性，得到超順磁
性的Fe₃O₄納米粒子；
將上述Fe₃O₄納米粒子分散到由無水乙醇、去離子水和氨水組成的混合溶劑中，超聲分
散15～45min后加入正硅酸乙酯，在室溫下繼續(xù)反應8～16h后，用去離子水反復洗滌沉淀至中
性后于50～80℃真空干燥8～16h，得到超順磁性的Fe₃O₄/SiO₂納米粒子；
將上述Fe₃O₄/SiO₂納米粒子分散到溶解有N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、甲基
丙烯酸縮水甘油酯和烯丙基縮水甘油醚以及偶氮二異丁腈引發(fā)劑的甲酰胺溶液中，然后加入
到溶解有Span60和Tween20復合分散劑的由正庚烷和四氯乙烯組成的混合溶劑中，在氮氣
保護下于55℃進行反相懸浮聚合反應4h，反應結(jié)束后用乙醇洗滌，正庚烷浸泡，60℃真空干
燥12h，得到核殼式的超順磁性聚合物微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，
其特征在于，在制備超順磁性的Fe₃O₄納米粒子過程中，所述的氯化鐵和硫酸亞鐵的摩爾比
為2∶1～1∶1，反應溫度為35～85℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，
其特征在于，在制備超順磁性的Fe₃O₄/SiO₂納米粒子過程中，所述的正硅酸乙酯和Fe₃O₄納
米粒子的質(zhì)量比為1∶2～2∶1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，
其特征在于，在制備核殼式的超順磁性聚合物微球過程中，所述的Fe₃O₄/SiO₂納米粒子的加
入量為聚合物單體總質(zhì)量的2％～10％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于生物酶固定化的核殼式超順磁性聚合物微球的制備方法，
其特征在于，所述的核殼式超順磁性聚合物微球可用于青霉素酰化酶、葡萄糖異構(gòu)酶、葡萄
糖轉(zhuǎn)苷酶、胰蛋白酶或淀粉酶的固定化。