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一株米根霉菌株及其誘變篩選方法和發酵生產富馬酸的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-25
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201110072287.5 
  • 技術(專利)名稱 一株米根霉菌株及其誘變篩選方法和發酵生產富馬酸的方法 
  • 項目單位 南京工業大學
  • 發明人 黃和,李霜,鄧月芳,徐晴,高敏 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 周子顏
  • 發布時間 2022-01-25  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一株米根霉菌株及其誘變篩選方法和發酵生產富馬酸的方法。該菌株分類命名為米根(Rhizopusoryzae)ME-F13,已保藏于中國典型培養物保藏中心,保藏號為CCTCCM2010351。得到該菌株的方法是采用離子注入物理誘變處理出發菌株ME-F12,然后將處理后的菌液涂布含2-D-脫氧葡萄糖(2-DG)的選擇固體平板上培養,挑取抗2-DG的單菌落同步糖化淀粉質原料發酵制備富馬酸。采用此方法篩選到的菌株糖化酶活力得到了提高,在對淀粉質原料不需要進行糖化處理的情況下,能直接利用其發酵,降低生產成本,具有工業化應用價值。
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  • 02

    說明書

    1.一株米根霉菌株,其分類命名為Rhizopus?oryzae?ME-F13,保藏日期為2010年12月16日,保藏單位全稱為中國典型培養物保藏中心,其保藏登記號為CCTCC?NO:M?2010351。2.利用權利要求1所述的Rhizopus?oryzae?ME-F13同步糖化發酵生產富馬酸的方法,其特征在于將Rhizopus?oryzae?ME-F13孢子懸浮液接種于種子培養基培養后,接種到發酵培養基中利用菌株自產的糖化酶同步糖化發酵生產富馬酸;其中種子培養基和發酵培養基的碳源是淀粉質原料液化液。3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于具體的方法是:將經斜面培養6~7天的Rhizopus?oryzae?ME-F13用無菌水洗下孢子,制成孢子懸浮液,接種于種子培養基中,在30~40℃、pH?2.5~2.7條件下培養28~32?h,再將按照5%~10%的接種量接種到發酵培養基中,在30~40℃下培養60~85?h;其中種子培養基和發酵培養基是由淀粉質原料液化液與無機鹽成分混合后,分別在115~121℃條件下滅菌15~20?min,冷卻后混合得到,發酵培養基中另外添加CaCO3作為中和劑。4.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于所述的淀粉質原料液化液的制備方法是:淀粉質原料與水以8-12%的比例混合成糊狀后,加熱到70℃,加入耐高溫淀粉酶,加酶量為800~1000?U/g干淀粉質原料,保溫10?min后繼續加熱到90℃,碘檢不變色后繼續加熱到100℃煮沸5~10?min,然后趁熱經過兩層紗布過濾,濾液冷卻后加水調整糖度,制成淀粉質原料液化液。5.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于所述的淀粉質原料為可溶性淀粉。6.?根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于所述的淀粉質原料為玉米粉。7.?根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于所述的淀粉質原料為脫胚玉米粉。8.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于所述的淀粉質原料為木薯粉。
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專利技術附圖

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