1.血管緊張素Ⅰ化學發(fā)光免疫定量檢測試劑盒,所述試劑盒包括:Ang?Ⅰ抗體包被板、辣根過氧化物酶標記的Ang?Ⅰ、Ang?Ⅰ校準品、Ang?Ⅰ質控品、發(fā)光液A液和B液、20倍濃縮洗液,其特征在于,所述的血管緊張素Ⅰ抗體包被板為包被有Ang?Ⅰ抗體的48孔白色微孔板,所述的辣根過氧化物酶純度要求RZ≥3.0,活性≥250U/mL,所述的Ang?Ⅰ質控品包括低值質控品和高值質控品,將Ang?Ⅰ用校準品稀釋液稀釋成系列濃度,濃度分別為0,0.2,0.5,2,5,12ng/mL,于2~8℃保存?zhèn)溆?;其中低值質控品的濃度范圍是0.46ng/mL,高值質控品的濃度范圍是10.35ng/mL,所述的發(fā)光液A包含0.7g/L魯米諾和0.165g/L對碘酚;發(fā)光液B包含0.675g/L過氧化脲,所述的20倍濃縮洗液包括75.5g/L?Tris,120g/L?NaCl,5mL/L?Tween-20,1g/LProclin300。?2.一種制備所述權利要求1的試劑盒的方法,其特征在于包括以下步驟:?1)Ang?Ⅰ抗體包被板制備?將Ang?Ⅰ抗體用pH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋至1~10μg/mL,在每個微孔板的孔中加100μL,于4℃冰箱中放置過夜,用洗滌液洗滌五次之后,用牛血清蛋白溶液對微孔板進行封閉,棄去孔內液體后,將酶標板干燥,密封,即得經Ang?Ⅰ抗體包被的48孔白色微孔板;?2)辣根過氧化物酶標記Ang?Ⅰ,得Ang?Ⅰ酶結合物;?利用高碘酸鈉氧化法,將Ang?Ⅰ與辣根過氧化物酶連接在一起,形成經辣根過氧化物酶標記的Ang?Ⅰ;?3)Ang?Ⅰ校準品;?將Ang?Ⅰ用校準品稀釋液稀釋成系列濃度,濃度分別為0,0.2,0.5,2,5,12ng/mL,于2~8℃保存?zhèn)溆茫?4)Ang?Ⅰ質控品的配制:在正常人血清中加入適量的Ang?Ⅰ純品,配制低值質控品和高值質控品,其濃度的平均值分別為0.46ng/mL和10.35ng/mL;?5)配制發(fā)光液A液和B液?A液是含有0.7g/L魯米諾和0.165g/L對碘酚的pH8.6的5mmol/LTris·HCl緩沖液;B液是濃度為0.675g/L的過氧化脲,用工藝用水配制;?6)配制20倍濃縮洗液?20倍濃縮洗液的配方如下:75.5g/L?Tris,120g/L?NaCl,5mL/L?Tween-20,1g/LProclin300;?7)組裝?將上述試劑組裝成盒,儲存于2~8℃;?8)對采用該方法制得的試劑盒進行物理檢查,準確度、劑量-反應曲線的線性、精密度、特異性、靈敏度、質控品的測定值和穩(wěn)定性進行測定。?
展開