本發(fā)明公開了一種從纖細(xì)席藻中提取藻藍(lán)蛋白的方法，首先是將硝酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、氯化鈣、檸檬酸、檸檬酸鐵銨、乙二胺四乙酸二鈉鹽、碳酸鈉，微量元素溶液按比例配制成纖細(xì)席藻培養(yǎng)液；然后將纖細(xì)席藻置于培養(yǎng)液中培養(yǎng)并制取纖細(xì)席藻粉；最后從纖細(xì)席藻粉中提取纖細(xì)席藻藻藍(lán)蛋白并將其純化。本發(fā)明所用方法易行、操作方便、安全可靠、產(chǎn)量高、產(chǎn)品質(zhì)量好，且所用設(shè)備簡單適用于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。

1.一種從纖細(xì)席藻中提取藻藍(lán)蛋白的方法，其特征在于包括如下步驟：A、培養(yǎng)液的配制：按每升水加入硝酸鈉0.8～2.5g、磷酸氫二鉀0.02～0.05g、硫酸鎂0.06～0.09g、氯化鈣0.02～0.05g、檸檬酸0.004～0.008g、檸檬酸鐵銨0.004～0.008g、乙二胺四乙酸二鈉鹽0.001～0.003g、碳酸鈉0.01～0.04g，微量元素溶液0.5～2ml，其中微量元素溶液按每100ml蒸餾水中加入硼酸270～300mg、四水氯化錳170～200mg、七水硫酸鋅18～25mg、二水鉬酸鈉15～30mg、五水硫酸銅6～10mg，完全溶解后攪勻制得培養(yǎng)液；B、纖細(xì)席藻的培養(yǎng)：首先是一級培養(yǎng)，由纖細(xì)席藻種接入培養(yǎng)液中靜止培養(yǎng)或通氣培養(yǎng)時，調(diào)節(jié)氣流在1.5～3.5L.min^-1，光強控制在65～85μE.m^-2.s^-1，溫度控制在22～35℃，當(dāng)培養(yǎng)5～10天后，轉(zhuǎn)入到二級培養(yǎng)；其次是二級培養(yǎng)，將一級培養(yǎng)所得的培養(yǎng)物接入到新的培養(yǎng)液中通氣培養(yǎng)，調(diào)節(jié)氣流在2.5～5L.min^-1，無菌處理，光強控制在75～95μE.m^-2.s^-1，溫度控制在22～35℃，培養(yǎng)5～10天后轉(zhuǎn)入到三級培養(yǎng)；第三是三級培養(yǎng)，將二級培養(yǎng)所得的培養(yǎng)物接入到新的培養(yǎng)液中通氣培養(yǎng)，調(diào)節(jié)氣流在3～6L.min^-1，無菌處理，光強控制在70～100μE.m^-2.s^-1，溫度控制在22～35℃，培養(yǎng)5～10天后作為繼續(xù)培養(yǎng)的接種種源；第四是繼續(xù)培養(yǎng)，首先是小循環(huán)培養(yǎng)池培養(yǎng)，將三級培養(yǎng)后所得的藻種接入小循環(huán)培養(yǎng)池，控制溫度在22～35℃，利用自然光進(jìn)行光照，控制光照強度在120～180μE.m^-2.s^-1，攪動培養(yǎng)基；其次是大循環(huán)培養(yǎng)池培養(yǎng)，將小循環(huán)培養(yǎng)池中培養(yǎng)4～7天后的纖細(xì)席藻轉(zhuǎn)接到大循環(huán)培養(yǎng)池中，將大循環(huán)培養(yǎng)池中培養(yǎng)10～20天后的纖細(xì)席藻過濾收得纖細(xì)席藻藻漿；C、纖細(xì)席藻粉的制備：將藻漿經(jīng)過離心獲得纖細(xì)席藻藻泥，將纖細(xì)席藻藻泥經(jīng)濃縮、脫水、干燥、粉碎后得到纖細(xì)席藻粉；D、纖細(xì)席藻藻藍(lán)蛋白的抽提：向纖細(xì)席藻粉中加入7～10倍重量的0.05～0.1mol.L^-1，pH值為6.0～8.0的磷酸緩沖溶液，充分?jǐn)噭蚝笾糜?10～-20℃下冰凍，待凍結(jié)后取出，置于20～30℃下融溶，待其完全融溶后，再將其冰凍，如此反復(fù)凍融3～5次，然后再3000～6000rpm下離心10～15min，收集上清液，即為藻藍(lán)蛋白粗提液；E、純化：在冰浴條件下，在藻藍(lán)蛋白的粗提液中加入飽和度為50～70％的硫酸銨避光鹽析20～40min，然后在3～5℃下3000～6000rpm離心15～25min，棄除上清液，用一倍體積的0.05～0.1mol.L^-1，pH值為6.0～8.0的磷酸緩沖液溶解沉淀物，避光透析20～30h后離心，取上清液用0.05～0.1mol.L^-1，pH值為6.0～8.0的磷酸緩沖液平衡好的DEAE-52離子交換柱，并用0.05～0.1mol.L^-1，pH值為6.0～8.0的磷酸緩沖液和0.1～0.3mol.L^-1的NaCl溶液洗脫，用收集藍(lán)色組分，冷凍干燥得純化的藻藍(lán)蛋白。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從纖細(xì)席藻中提取藻藍(lán)蛋白的方法，其特征在于：小循環(huán)培養(yǎng)池與大循環(huán)培養(yǎng)池中培養(yǎng)液的體積比為1∶20～25。