本發明公開了屬于生物技術領域的一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒及檢測方法。該試劑盒包含RPA凍干顆粒，緩沖液，醋酸鎂，RPA反應引物，RPA反應探針。本發明利用RPA技術建立日本血吸蟲的檢測方法，其靈敏度與特異性與Q?PCR法相當，遠遠高于Kato?Katz法、毛蚴孵育法、ELISA以及IHA，整個反應時間在10?20min內完成，結果判定僅需通過熒光曲線的改變來判定。該檢測試劑盒具有靈敏，特異，結果判定簡便，快捷等優點。不僅適用于床邊診斷而且可以用于現場研究，環境評估。

1.一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包含：RPA凍干顆
粒，緩沖液，醋酸鎂，RPA反應引物，RPA反應探針，所述RPA反應引物的核苷酸序列如序列表
SEQ ID No.1和SEQ ID No.2，所述RPA反應探針的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.3所示。
2.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑
盒還包含雙蒸水和日本血吸蟲基因組DNA。
3.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒，其特征在于，所述RPA凍
干顆粒包含噬菌體重組酶UvsX，輔助因子UvsY，DNA聚合酶，單鏈DNA結合蛋白，dNTPS。
4.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖
液為Rehydration Buffer。
5.一種利用權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒的非疾病診斷和治
療目的的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)在RPA凍干顆粒中加入29.5μL Rehydration Buffer，2.1μL 10μM Primer A，2.1μL
10μM Primer B，0.6μL 10μM探針，10.7μL雙蒸水，2.5μL模板，在反應管蓋上加醋酸鎂2.5μ
L，上下顛倒反應管使之充分混勻后離心，放置于TwistDX熒光檢測器內，儀器自動升溫至38
℃孵育，在5-20分鐘內通過觀測熒光曲線進行結果判讀；
(2)結果判定：含有日本血吸蟲基因組DNA的反應管熒光曲線上升，陰性對照為平滑的
直線；
所述Primer A的序列如序列表SEQ ID No.1所示；所述Primer B的序列如序列表SEQ
ID No.2所示；所述探針的序列如序列表SEQ ID No.3所示；所述模板為日本血吸蟲基因組
DNA。