本發明公開了一種板栗疫病菌分子檢測試劑盒及其使用方法。本發明的試劑盒包括10μmol/L的引物CP1/CP2各1μL；10μmol/L的引物SC1/SC2各1μL、ddHO7.5μL、Premix12.5μL；其中，CP1序列為5＇－CGGCCCACTAAACTCTTTGT－3＇，CP2序列為5＇－ATTTCAGGGCCTACCGTTTT－3＇SC1序列為5＇－AACGGTGACCCTTCTGGGGC－3＇，SC2序列為5＇－AACGGTGACCGCAAAGGACTC－3＇。本發明克服RAPD穩定性差、重復性差等缺點，同時提高了病害檢測的準確性；本發明可快速準確的對板栗疫病菌進行分子鑒定和板栗疫病的早期診斷，對控制板栗疫病的檢疫及病害的防治具有重要意義。

1.一種板栗疫病菌分子檢測試劑盒，其特征在于，其包括10μmol/L的引物
CP1/CP2各1μL；10μmol/L的引物SC1/SC2各1μL、ddH₂O7.5μL、Premix12.5μL；
其中，CP1序列為5＇－CGGCCCACTAAACTCTTTGT－3＇，CP2序列為5＇－
ATTTCAGGGCCTACCGTTTT－3＇SC1序列為5＇－AACGGTGACCCTTCTGGGGC－
3＇，SC2序列為5＇－AACGGTGACCGCAAAGGACTC－3＇。
2.根據權利要求1所述的板栗疫病菌分子檢測試劑盒的使用方法，其特征是，
其步驟如下：
(1)提取純培養菌株基因組DNA或所取植物組織樣總DNA；
(2)所述的反應體系包含：10μmol/L的引物CP1/CP2各1μL，10μmol/L的引物
SC1/SC2各1μL；12.5μLPremix，ddH₂O7.5μL；加(1)中提取的DNA提取液1μL，
組成反應混合液；
(3)PCR反應條件為：94℃預變性4min；94℃變性40sec，62℃退火30sec，72
℃延伸30sec，共35個循環；72℃延伸7min；
(4)PCR產物的電泳檢測：取(3)中PCR擴增產物5μL，在質量濃度1.5％～2％
的瓊脂糖凝膠上進行電泳，電泳緩沖液為1×TAE，100V電壓下電泳20min后，經溴
化乙錠染色后在紫外燈下檢測結果；如果存在分子量為285bp和389bp的雙片段，則判
定所述菌株中或植株組織樣中存在板栗疫病菌。