本發明公開了一種12種腦炎病毒核酸多重PCR檢測試劑盒及其應用，包括有用于擴增如下12種腦炎病毒特異基因位點的引物：JeV，HTLV1，WNV，HSV1，HSVII，HHV6，JCV，HTLV2，BBF，HCMV，EBV及VZV。本發明具有以下優點：本發明所述的試劑盒能夠多重檢測、靈敏度高且使用快捷方便。此外，本發明采用特異性的引物序列，保證檢測結果的可靠性；該檢測方法操作簡單，省時省力；檢測通量大，試劑耗材成本低；可直接對腦炎病原體樣本提取的核酸進行檢測；對檢測平臺和人工技術水平要求低，能夠在常規檢測中廣泛推廣。

1.一種12種腦炎病毒核酸多重PCR檢測試劑盒，其特征在于，包括有用于擴增如下12種腦炎病毒特異基因位點的嵌合引物以及通用引物：JeV，HTLV1，WNV，HSV1，HSVII，HHV6，JCV，HTLV2，BBF，HCMV，EBV及VZV；所述嵌合引物是在特異性引物的5’端添加一段通用引物序列組合而成，其中，特異性引物序列為：JeV，SEQ ID NO.1～2；HTLV1，SEQ ID NO.3～4；WNV，SEQ ID NO.5～6；HSV1，SEQ ID NO.7～8；HSVII，SEQ ID NO.9～10；HHV6，SEQ ID NO.11～12；JCV，SEQ ID NO.13～14；HTLV2，SEQ ID NO.15～16；BBF，SEQ ID NO.17～18；HCMV，SEQID NO.19～20；EBV，SEQ ID NO.21～22；及VZV，SEQ ID NO.23～24；通用引物序列為：SEQID NO.25～26。2.根據權利要求1所述的12種腦炎病毒核酸多重PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述通用引物在擴增體系中的終濃度為400nM～1μM；所述嵌合引物在擴增體系中的終濃度為20nM～100nM。3.根據權利要求2所述的12種腦炎病毒核酸多重PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述通用引物在擴增體系中的終濃度為800nM；所述嵌合引物在擴增體系中的終濃度為60nM。