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用于篩選強遷移能力的臍帶間充質干細胞的流式試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-25
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201611029636.4 
  • 技術(專利)名稱 用于篩選強遷移能力的臍帶間充質干細胞的流式試劑盒 
  • 項目單位 天津市康婷生物工程集團有限公司
  • 發明人 張碩,馬潔 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 沈海萌
  • 發布時間 2022-01-25  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種用于篩選具有較強遷移能力的臍帶間充質干細胞的流式檢測試劑盒,試劑盒組成包括:標準直徑微球、PE?CD105、APC?CD73、FITC?CD90、PerCP?Cy5.5?CD166、FITC?CD11b、PE?CD34、PE?CD45、PE?CD19、PE?CD80、PE?CD86、FITC?HLA?DR及相應的同型對照抗體。本發明通過設置標準“Gate”和增加檢測CD166使檢測結果直接與細胞制劑的遷移能力與有效性相關聯;本發明確保多種免疫排斥相關的細胞表面標志物如CD80\CD86為陰性,從而保證臨床患者人身安全;本發明減少了檢測細胞表面標志物的過程中對細胞樣本的消耗量。
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  • 02

    說明書

    1.一種用于篩選強遷移能力的臍帶間充質干細胞的流式試劑盒,其特征在于:試劑盒組成:具體說明如下:⑴Standard Mixture:將ZPH-MMA30K型30微米標準微球溶于1.5mL蒸餾水,與F-13838型15微米標準微球相混合,超聲處理30s后振蕩混勻,存放于4℃條件下,得到StandardMixture;⑵Isotype Mixture:將350μL的PE-IgG1k抗體、250μL的APC-IgG1k抗體、1150μL的FITC-IgG1k抗體、250μL的PerCP-Cy5.5-IgG1k抗體相混合,避光存放于4℃條件下,得到Isotype Mixture;⑶Positive Mixture:將295μL的PE-CD105抗體、295μL的APC-CD73抗體、115μL的FITC-CD90抗體、295μL的PerCP-Cy5.5-CD166抗體相混合,避光存放于4℃條件下,得到PositiveMixture;⑷Negative Mixture:將240μL的FITC-CD11b抗體、952μL的PE-CD34/FITC-HLA-DR抗體、952μL的PE-CD45抗體、952μL的PE-CD19抗體、952μL的PE-CD80抗體、952μL的PE-CD86抗體相混合,避光存放于4℃條件下。2.根據權利要求1所述的用于篩選強遷移能力的臍帶間充質干細胞的流式試劑盒,其特征在于:操作步驟如下:(1)取1.5*106量的臍帶間充質干細胞樣本,經離心、洗滌,用PBS重懸后制成密度為5*106cells/mL的細胞懸液A;(2)取4支一次性流式上樣管,分別命名為STD管、ISO管、POS管、NEG管;(3)向STD管加入0.5mL PBS,向ISO管、POS管、NEG管分別加入100μL細胞懸液A;(4)向ISO管、POS管、NEG管分別加入20μL Isotype Mixture、10μL Positive Mixture、50μL Negative Mixture,在15℃條件下避光孵育30min;(5)向ISO管、POS管、NEG管均加入2mL PBS,在15℃條件下200g離心3min后去除上清液,重復本步驟2次;(6)將Standard Mixture超聲處理30s后振蕩混勻后取25μL加入至STD管,向ISO管、POS管、NEG管分別加入500μL PBS,將STD管、ISO管、POS管、NEG管振蕩混勻;(7)依照STD管、ISO管、POS管、NEG管的順序上機檢測。
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專利技術附圖

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