本發明提供用于特異性檢測人肝癌細胞標志物的引物和探針，包括用于檢測磷脂酰肌醇蛋白聚糖cDNA的引物和探針（Seq ID No.1-3）以及用于檢測甲胎蛋白cDNA的引物和探針（Seq ID No.4-6）。本發明還提供含有所述引物和探針的用于多重實時熒光定量PCR檢測人肝癌細胞標志物的試劑盒。本發明采用多重實時熒光定量PCR技術，從mRNA水平上檢測人肝癌細胞中甲胎蛋白信使RNA(AFP mRNA)和磷脂酰肌醇蛋白聚糖信使RNA(GPC3mRNA)，檢測方法簡便、快速，靈敏度高，特異性強，整個檢測反應只需花費100分鐘，為人肝細胞發生癌變的特異檢出提供重要技術支持。

1.用于多重實時熒光定量PCR檢測人肝癌細胞標志物的引物和
探針在制備用于多重實時熒光定量PCR檢測人肝癌細胞標志物的試
劑或試劑盒中的用途，其特征在于，包括用于檢測磷脂酰肌醇蛋白聚
糖cDNA的引物和探針以及用于檢測甲胎蛋白cDNA的引物和探針：
用于檢測磷脂酰肌醇蛋白聚糖cDNA的引物和探針為：
上游引物GPC3F：5’-CTGTCCCTTGAAGAACTTGTGA-3’
下游引物GPC3R：5’-TTGAGAATGGGCACATAACTTG-3’
探針GPC3Probe：5’-FAM-ACAGAATCTATGACATGGAGAA
CGT-TAMRA-3’；
用于檢測甲胎蛋白cDNA的引物和探針為：
上游引物AFP?F：5’-GACAGCCTCAAGTTGTTCCTC-3’
下游引物AFP?R：5’-GGCTGACATTATTATCGGACAC-3’
探針AFP?Probe：5’-HEX-TATCAGACATGAAATGACTCCAG
TAA-TAMRA-3’。
2.一種用于多重實時熒光定量PCR檢測人肝癌細胞標志物的試
劑盒，其特征在于，包含如下引物和探針：包括用于檢測磷脂酰肌醇
蛋白聚糖cDNA的引物和探針以及用于檢測甲胎蛋白cDNA的引物和
探針：
用于檢測磷脂酰肌醇蛋白聚糖cDNA的引物和探針為：
上游引物GPC3F：5’-CTGTCCCTTGAAGAACTTGTGA-3’
下游引物GPC3R：5’-TTGAGAATGGGCACATAACTTG-3’
探針GPC3Probe：5’-FAM-ACAGAATCTATGACATGGAGAAC
GT-TAMRA-3’；
用于檢測甲胎蛋白cDNA的引物和探針為：
上游引物AFP?F：5’-GACAGCCTCAAGTTGTTCCTC-3’
下游引物AFP?R：5’-GGCTGACATTATTATCGGACAC-3’
探針AFP?Probe：5’-HEX-TATCAGACATGAAATGACTCCAGT
AA-TAMRA-3’。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包
括dNTPs、Taq?DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反應緩沖液、二甲基亞砜中
的至少一種。