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海雀稗幼穗離體培養(yǎng)植株再生方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-02-05
  • 技術(shù)成熟度:可以量產(chǎn)
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN200710066909.7 
  • 技術(shù)(專利)名稱 海雀稗幼穗離體培養(yǎng)植株再生方法 
  • 項目單位 新昌縣白云草業(yè)研究所
  • 發(fā)明人 梁流芳,佘建明,楊郁文,董民強,吳瑛瑛,鐘小仙,陳志一,倪萬潮 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-動物藥材養(yǎng)殖
  • 技術(shù)成熟度 可以量產(chǎn)
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 秦瑞瑩
  • 發(fā)布時間 2022-02-05  
  • 01

    項目簡介

    海雀稗幼穗離體培養(yǎng)植株再生技術(shù),屬于植物組織培養(yǎng)方法,現(xiàn)有的海雀稗離體培養(yǎng)技術(shù)存在著誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織在繼代培養(yǎng)過程中喪失綠苗分化能力、不宜用于體細胞突變體篩選和農(nóng)桿菌介導(dǎo)法基因轉(zhuǎn)化的缺陷,本發(fā)明以穎花分花時期的幼穗為外植體材料,在附加2,4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6-芐基氨基嘌呤0.05mg/L的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上獲得淺黃色、干燥、顆粒狀愈傷組織的數(shù)量占誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織總數(shù)40%以上;在提高瓊脂條-固化劑用量1倍的培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng),愈傷組織保持顆粒狀結(jié)構(gòu),經(jīng)過連續(xù)3代繼代培養(yǎng)的愈傷組織的綠苗分化率達98%。本方法適用于海雀稗微繁殖、體細胞突變體篩選和基因轉(zhuǎn)化。
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  • 02

    說明書

    1.海雀稗幼穗離體培養(yǎng)植株再生方法,其特征在于:1)材料選用海雀稗處于穎花分花時期的幼穗為外植體材料;2)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基由MS大量元素、MS微量元素與B5維生素組成,添加蔗糖30g/L;愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和愈傷組織繼代培養(yǎng)基:附加激素2,4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L和6-芐基氨基嘌呤0.05mg/L;愈傷組織分化培養(yǎng)基:附加激素6-芐基氨基嘌呤2.0mg/L;在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和愈傷組織分化培養(yǎng)基中,以8g/L的瓊脂條作為固化劑;在愈傷組織繼代培養(yǎng)基中,以16g/L的瓊脂條作為固化劑;上述各種培養(yǎng)基在高壓滅菌前用氫氧化鈉和鹽酸調(diào)整pH值至5.8;3)培養(yǎng)方法取處于穎花分花時期的幼穗,在超凈工作臺上用70%的酒精徹底擦拭包在幼穗外部的葉鞘和莖,剝出幼穗,切成2~3mm長的段塊,接種在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,在散射光下培養(yǎng),15d左右從幼穗誘導(dǎo)產(chǎn)生出淺黃色、干燥、顆粒狀的愈傷組織;挑選淺黃色、干燥、顆粒狀的愈傷組織轉(zhuǎn)移到愈傷組織繼代培養(yǎng)基進行繼代培養(yǎng),經(jīng)過連續(xù)3次繼代培養(yǎng)后的顆粒狀愈傷組織再轉(zhuǎn)移到愈傷組織分化培養(yǎng)基上,在光照條件下培養(yǎng),15d左右分化出綠苗;在離體培養(yǎng)過程中培養(yǎng)室溫度為26±2℃。
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專利技術(shù)附圖

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