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一種誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-06
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010248490.9 
  • 技術(專利)名稱 一種誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法 
  • 項目單位 武漢大學
  • 發明人 李立家,何世斌,李慧,譚珺雋,張琦 
  • 行業類別 藥品-中藥
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 褚峻亦
  • 發布時間 2022-01-06  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法,屬于植物育種領域。主要步驟是選取合適的雄穗進行消毒,然后在提取液中擠壓小穗、過篩、離心收集小孢子,再接種到誘導培養基中,置于32~36℃的烘箱熱激處理24~48h,再置于25~28℃的培養室,在搖床上進行暗培養20~25天,形成胚狀體。本發明誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法,具有成胚率高、培養周期短、操作簡單等優點。本發明用于玉米遺傳育種,將大大加快育種進程,顯著地提高選擇效果。
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  • 02

    說明書

    1.一種誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法,其特征在于依次包括以下步驟:1)玉米長到大喇叭口時期,選取生長健壯,處于單核晚期的雄穗,用保鮮膜包裹,于5~8℃冷處理7~14天;2)將雄穗上的小穗剝下進行表面消毒后,轉移到離心管中,加入預冷至3~5℃的提取液,擠壓小穗獲得小孢子懸浮液,經100目不銹鋼篩過濾,濾液離心處理后,倒掉上清液,然后加誘導培養基,所獲得的小孢子經鏡檢計數后,以10,000~20,000個/毫升的密度接種到培養器皿內,用封口膜封口;所述的提取液成分如下:150mg/l(NH4)2SO4+3000mg/l?KNO3+150mg/l?CaCl2·2H2O+450mg/l?MgSO4·7H2O+600mg/l?KH2PO4+60g/l蔗糖+2.5g/l?3-(N-嗎啡啉)丙磺酸,加KOH調節PH為6.0;離心處理過程具體為在100g下離心3min,重復3次;所述的誘導培養基為“正14”培養基+120g/l蔗糖+0.1mg/l?2,3,5三碘苯甲酸+500mg/l酪蛋白水解物+200mg/l活性碳+16mg/l瓊脂糖,加KOH調節PH為6.0;3)將培養器皿放到32~36℃的烘箱熱激處理24~48h,再置于25~28℃的培養室,在搖床上進行暗培養20~25天,形成胚狀體。2.如權利要求1所述的誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法,其特征在于:步驟1中所述表面消毒過程具體為先浸入體積比75%酒精消毒30s,再用質量體積比0.1%?HgCl2溶液消毒10min,然后無菌水清洗3次。3.如權利要求1所述的誘導玉米小孢子形成胚狀體的方法,其特征在于:所述的“正14”培養基成分如下:大量元素:(NH4)2SO4?150mg/l、KNO3?3000mg/l、CaCl2·2H2O?150mg/l、MgSO4·7H2O?450mg/l、KH2PO4?600mg/l;微量元素:KI?0.75mg/l、H3BO3?3mg/l、MnSO4·H2O?10mg/l、ZnSO4·7H2O?2mg/l、Na2MoO4·2H2O0.25mg/l、GuSO4·5H2O?0.025mg/l、Cocl2·6H2O?0.025mg/l、Na2EDTA?37.3mg/l、FeSO4·7H2O27.8mg/l;有機成分:甘氨酸2、鹽酸硫胺素10、鹽酸吡哆素1、煙酸1、肌醇100、2,4-二氯苯氧乙酸2、6-芐氨基嘌呤1、萘乙酸1。?
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