1.一種固定化酶水解降低蛋清蛋白致敏性的方法，其特征是按以下步驟：(1)?生物素化標記蛋白酶的制備：稱取一定量的生物素，用適量pH5.5、0.02M?PBS緩沖液溶解，按生物素與1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺摩爾比為1:3:3比例混合，于室溫下反應1.5?h；以木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、Flavourzyme風味蛋白酶、Alcalase堿性蛋白酶中任意一種酶溶于磷酸鹽緩沖液中配制蛋白酶溶液，將活化的生物素與蛋白酶摩爾比3:1比例混合，調整至酶最適pH值，于4℃下反應過夜后，用PBS緩沖液透析除去未反應的生物素，透析產物加入甘油于-20℃下保存備用；(2)?鏈霉親和素偶聯磁珠：取一定量的羧基化的磁珠，依次用無水乙醇、NaOH、HCl?及PBS緩沖液洗滌后，用PBS緩沖液重懸磁珠，按磁珠表面羧基與1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺、N-羥基硫代琥珀酰亞胺摩爾比為1:3:3分別加1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺以及N-羥基硫代琥珀酰亞胺，37℃振蕩反應2?h?活化磁珠表面羧基；磁珠通過磁架回收，并用PBS緩沖液洗滌三次后，重懸于PBS緩沖液中；活化后的磁珠加入含鏈霉親和素pH8.0的PBS緩沖液37℃反應2?h，最后反應產物加入乙醇胺室溫封閉2?h；磁架回收磁珠，PBS緩沖液洗滌三次后，重懸于含0.05%疊氮鈉的pH8.0的PBS緩沖液中，4℃保存備用；(3)?固定化酶的制備：固定化酶利用鏈霉親和素磁珠與生物素化蛋白酶結合反應制備，反應體系中鏈霉親和素磁珠與生物素化蛋白酶的摩爾比為1:1-1:4，反應在37?℃下振蕩孵育20?min，經磁力架進行磁分離，移除上清液，回收磁珠，即得固定化酶；(4)?將蛋清蛋白溶液與緩沖溶液按一定比例混合均勻，之后轉移至水解罐，調節水解液的溫度，控制溫度為37-60℃，pH值6.0-8.0，然后按酶活與蛋白底物的比例為5000-30000?U/g蛋白質加入固定化酶，混勻后于恒溫水浴鍋中水解，期間不斷攪拌，并控制酶解體系的pH值6.0-8.0，水解時間為2.0-4.0?h，反應結束后經磁力架進行磁分離，收集蛋清蛋白酶解液；(5)?在步驟（4）收集的蛋清蛋白酶解液中加入0.5-3.0%食品級粉狀活性炭，將水解液置于50℃的水浴鍋內處理60?min，然后經5000?r/min離心獲得上清液；(6)?將步驟（5）所處理的酶解液在真空度為0.08?MPa、溫度為50℃進行真空濃縮，濃縮至固形物在60%以上；(7)?將步驟（6）所得蛋清水解多肽濃縮物在-40?℃預凍12?h，冷阱溫度為-65℃，真空度100?Pa，加熱板溫度50?℃，真空冷凍干燥24?h，水分含量在5%以下，干燥后所得粉末即為低致敏蛋清蛋白粉。
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