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用于與BRAF基因雜交的DNA探針庫(kù)及采用其富集BRAF基因片段的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-01-31
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201310429789.8 
  • 技術(shù)(專利)名稱 用于與BRAF基因雜交的DNA探針庫(kù)及采用其富集BRAF基因片段的方法 
  • 項(xiàng)目單位 南京世和基因生物技術(shù)有限公司
  • 發(fā)明人 邵陽(yáng) 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-制藥設(shè)備
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 錢心怡
  • 發(fā)布時(shí)間 2022-01-31  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明提供了一種用于與BRAF基因雜交的DNA探針庫(kù),所述DNA探針庫(kù)包括一個(gè)或多個(gè)能夠與BRAF基因雜交的DNA探針,所述DNA探針包含以下序列:SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5、或SEQ?ID?NO.6。本發(fā)明還提供了采用該DNA探針庫(kù)富集BRAF基因片段的方法。基于此,本發(fā)明還提供了一種檢測(cè)BRAF基因的基因結(jié)構(gòu)突變的方法。采用本發(fā)明的方法可以成數(shù)千倍地富集得到BRAF基因片段,并可以將其用于下一代測(cè)序技術(shù)以進(jìn)行基因結(jié)構(gòu)突變的檢測(cè),包括單堿基突變、mRNA缺失或增多、mRNA結(jié)構(gòu)顛換、mRNA剪接變化。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種用于與BRAF基因雜交的DNA探針庫(kù),其特征在于,所述DNA探針庫(kù)包括如以下序
    列所示的能夠與BRAF基因雜交的DNA探針:
    SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5和SEQIDNO.6。
    2.一種富集BRAF基因片段的方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:
    1)獲得受試者的DNA樣本庫(kù),所述DNA樣本庫(kù)由雙鏈DNA片段組成,并且所述步驟1)包
    括:
    1-1)提取受試者的全基因組DNA,然后將其片段化;或者
    1-2)提取受試者的mRNA,將其片段化,然后以該經(jīng)片段化的mRNA為模板合成雙鏈cDNA;
    其中,所述受試者為哺乳動(dòng)物,且從受試者的細(xì)胞、組織或體液樣本中提取全基因組
    DNA或mRNA;并且所述DNA片段的長(zhǎng)度為150-600bp;
    2)獲得能夠與BRAF基因雜交的DNA探針庫(kù),所述DNA探針庫(kù)為權(quán)利要求1所述的DNA探針
    庫(kù);
    3)使所述DNA探針庫(kù)與所述DNA樣本庫(kù)進(jìn)行雜交,并且所述步驟3)包括:
    3-1)采用選擇性標(biāo)記標(biāo)記DNA探針庫(kù)中的DNA探針;和
    3-2)使所述DNA探針庫(kù)與DNA樣本庫(kù)進(jìn)行雜交;和
    4)利用DNA探針上的選擇性標(biāo)記分離步驟3)的雜交產(chǎn)物,然后釋放經(jīng)雜交富集的BRAF
    基因片段。
    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述受試者為人。
    4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述DNA片段的長(zhǎng)度為150-
    200bp。
    5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述步驟3-2)包括在PCR擴(kuò)增儀中,在65℃
    下將所述DNA探針庫(kù)與DNA樣本庫(kù)孵育24小時(shí)。
    6.根據(jù)權(quán)利要求2至5中任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,所述步驟3-1)中的選擇性標(biāo)
    記為生物素,所述步驟4)中利用鏈霉親和素-生物素的親和作用分離雜交產(chǎn)物。
    7.一種用于富集BRAF基因片段的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包含權(quán)利要求1所述
    的DNA探針庫(kù)。
    展開

專利技術(shù)附圖

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    專利證書

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