本申請(qǐng)公開了用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑、檢測(cè)方法及應(yīng)用。本申請(qǐng)用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑，包括引物對(duì)和探針，探針在引物對(duì)擴(kuò)增靶標(biāo)區(qū)域內(nèi)，引物對(duì)上游引物為Seq ID No.1所示序列，下游引物為Seq ID No.2所示序列，探針為Seq ID No.3所示序列或Seq ID No.3所示序列的反向互補(bǔ)序列。本申請(qǐng)的H5N8禽流感病毒檢測(cè)試劑，對(duì)禽流感亞種H5N8具有很強(qiáng)特異性，能夠準(zhǔn)確靈敏的從眾多禽流感病毒中特異性檢出H5N8。基于本申請(qǐng)?jiān)噭┑腍5N8禽流感病毒檢測(cè)方法，耗時(shí)短，可很快作出判定結(jié)果，對(duì)于控制流感流行，減少經(jīng)濟(jì)損失，最大限度保護(hù)社會(huì)人群健康和生命具有很大意義。

1.一種用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑，其特征在于：所述試劑包括引物對(duì)和探針，所述探針在引物對(duì)的擴(kuò)增靶標(biāo)區(qū)域內(nèi)，所述引物對(duì)的上游引物為Seq ID No.2所示序列，所述引物對(duì)的下游引物為Seq ID No.3所示序列，所述探針為Seq ID No.1所示序列或者Seq IDNo.1所示序列的反向互補(bǔ)序列；Seq ID No.1：5’-CTGCACATAAATACCCAACYCTGTA-3’Seq ID No.2：5’-TGAGGAATGTTCTTGTTATCCAAATGA-3’Seq ID No.3：5’-CCACTGTATCCCGACCAATT-3’Seq ID No.1所示序列中，Y為C或者T堿基。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑，其特征在于：所述探針的5’端標(biāo)記有HEX熒光基因，3’端標(biāo)記有BHQ淬滅基團(tuán)。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑在非診斷治療目的的H5N8禽流感病毒檢測(cè)中的應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑在制備H5N8禽流感病毒檢測(cè)試劑盒或設(shè)備中的應(yīng)用。5.一種用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中含有權(quán)利要求1或2所述的用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑。6.一種用于H5N8禽流感病毒檢測(cè)的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中含有至少一組混合試劑，每組混合試劑由12.5μL 2×real time PCR Buffer、1μL 25×enzyme mix、終濃度0.4μM/L的引物對(duì)和終濃度0.2μM/L的探針組成；所述引物對(duì)的上游引物為Seq ID No.2所示序列，所述引物對(duì)的下游引物為Seq ID No.3所示序列，所述探針為Seq ID No.1所示序列或者Seq ID No.1所示序列的反向互補(bǔ)序列。7.一種非診斷治療目的的H5N8禽流感病毒的逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法，其特征在于：包括以下步驟：(1)提取待測(cè)樣品的基因組RNA；(2)采用權(quán)利要求6所述的試劑盒，向所述混合試劑中加入步驟(1)提取的基因組RNA，配制成反應(yīng)溶液；(3)將步驟(2)配制的反應(yīng)溶液，在50℃反轉(zhuǎn)錄30min、95℃熱啟動(dòng)10min，然后進(jìn)入45個(gè)循環(huán)：95℃15s、55℃45s，在循環(huán)過程中于55℃時(shí)采集熒光。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的H5N8禽流感病毒的逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法，其特征在于：所述基因組RNA的提取采用RNA提取試劑盒，或者Trizol核酸抽提法。