本發(fā)明一種快速檢測鉤蟲病感染的免疫層析試條，包括：樣品墊、緊密連接于樣品墊的含有膠體金標(biāo)記探針的金標(biāo)墊、與金標(biāo)墊緊密連接的纖維素膜和緊密連接于纖維素膜另一端的吸水墊；纖維素膜上遠(yuǎn)離金標(biāo)墊的一端設(shè)置質(zhì)控線，在質(zhì)控線和金標(biāo)墊之間的纖維素膜上設(shè)置檢測線，檢測線由鉤蟲純化蟲體抗原組成，鉤蟲純化蟲體抗原為來源于美洲鉤蟲成蟲蟲體的可溶性抗原液；膠體金標(biāo)記探針為金黃色葡萄球菌A蛋白或鏈球菌G蛋白；質(zhì)控線由特異性結(jié)合膠體金標(biāo)記探針的抗體組成。本發(fā)明還提供了上述的免疫層析試條的制備方法。本發(fā)明的免疫層析試條具有簡便性、敏感性、特異性和快速性的優(yōu)點(diǎn)，可以同時(shí)應(yīng)用于人、畜及野生動(dòng)物的臨床和現(xiàn)場使用。

1.一種快速檢測鉤蟲病感染的免疫層析試條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)一個(gè)制備鉤蟲純化蟲體抗原溶液的步驟，收集美洲鉤蟲成蟲1000～2000條，用磷酸
緩沖液反復(fù)洗滌，將蟲體置于預(yù)冷的研缽內(nèi)，不斷倒入液氮充分研磨，再加入蟲體壓積15～
25倍體積的浸泡液浸泡沖洗蟲體，所述的浸泡液由正辛基葡糖苷、苯甲基磺酰氟、甲苯磺酰
賴氨酰氯甲酮、乙二胺四乙酸、乙二醇雙(2-氨基乙醚)四乙酸組成，在所述的浸泡液中，正
辛基葡糖苷的質(zhì)量百分比濃度為1.5％，所述的苯甲基磺酰氟的濃度為1mM、所述的甲苯磺
酰賴氨酰氯甲酮的濃度為0.2mM，所述的乙二胺四乙酸的濃度為1mM，所述的乙二醇雙(2-氨
基乙醚)四乙酸的濃度為1mM，然后在液氮和30～40℃反復(fù)凍融5～8次，冰浴過夜，離心，上
清液在磷酸緩沖液中透析48～72小時(shí)，透析完成后，在溶液中加入硫酸銨至60～75％的飽
和度并產(chǎn)生沉淀，冰浴過夜，離心，棄上清，沉淀用磷酸緩沖液復(fù)溶，在磷酸緩沖液中透析10
～20小時(shí)，回收透析液，離心，上清即是鉤蟲純化蟲體抗原可溶性抗原，將鉤蟲成蟲蟲體可
溶性抗原液蛋白濃度調(diào)整到1～20mg/mL；
2)一個(gè)制備膠體金標(biāo)記探針的步驟，將1～5mg金黃色葡萄球菌A蛋白或鏈球菌G蛋白加
入100mL膠體金溶液中，離心取沉淀，復(fù)溶到4～25mg/mL；
3)一個(gè)制備與膠體金標(biāo)記探針特異結(jié)合的抗體的步驟，所述的膠體金標(biāo)記探針特異結(jié)
合的抗體特異性的結(jié)合金黃色葡萄球菌A蛋白或鏈球菌G蛋白，將與膠體金標(biāo)記探針特異結(jié)
合的抗體的溶液濃度調(diào)整到0.1～5mg/mL；
4)將鉤蟲純化蟲體抗原溶液噴到纖維素膜上形成檢測線，將能與膠體金標(biāo)記探針特異
結(jié)合的抗體溶液噴到所述纖維素膜的另一區(qū)域形成質(zhì)控線；
5)將玻璃纖維膜或聚脂膜浸入膠體金標(biāo)記探針溶液，制備金標(biāo)墊，向膠體金標(biāo)記探針
溶液中添加質(zhì)量百分比濃度為5％～20％的蔗糖，將金標(biāo)墊在25～40℃下干燥0.5～1小時(shí)，
再與纖維素膜粘貼；
6)上述纖維素膜在噴有檢測線、質(zhì)控線后，先在25～40℃下干燥0.5～2小時(shí)，再粘貼吸
水墊，將吸水墊粘貼在所述纖維素膜的遠(yuǎn)離檢測線的一端，將金標(biāo)墊粘貼在纖維素膜的靠
近檢測線的一端，將樣品墊粘貼于金標(biāo)墊上與所述纖維素膜相對的一端。
2.一組用于免疫學(xué)方法檢測鉤蟲病的試劑，其特征在于：包括(1)鉤蟲純化蟲體抗原，
(2)金黃色葡萄球菌A蛋白或鏈球菌G蛋白標(biāo)記物；所述的鉤蟲純化蟲體抗原按如下方法制
備：收集美洲鉤蟲成蟲1000～2000條，用磷酸緩沖液反復(fù)洗滌，將蟲體置于預(yù)冷的研缽內(nèi)，
不斷倒入液氮充分研磨，再加入蟲體壓積15～25倍體積的浸泡液浸泡沖洗蟲體，所述的浸
泡液由正辛基葡糖苷、苯甲基磺酰氟、甲苯磺酰賴氨酰氯甲酮、乙二胺四乙酸、乙二醇雙(2-
氨基乙醚)四乙酸組成，在所述的浸泡液中，正辛基葡糖苷的質(zhì)量百分比濃度為1.5％，所述
的苯甲基磺酰氟的濃度為1mM、所述的甲苯磺酰賴氨酰氯甲酮的濃度為0.2mM，所述的乙二
胺四乙酸的濃度為1mM，所述的乙二醇雙(2-氨基乙醚)四乙酸的濃度為1mM，然后在液氮和
30～40℃反復(fù)凍融5～8次，冰浴過夜，離心，上清液在磷酸緩沖液中透析48～72小時(shí)，透析
完成后，在溶液中加入硫酸銨至60～75％的飽和度并產(chǎn)生沉淀，冰浴過夜，離心，棄上清，沉
淀用磷酸緩沖液復(fù)溶，在磷酸緩沖液中透析10～20小時(shí)，回收透析液，離心，上清即是鉤蟲
純化蟲體抗原可溶性抗原。