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運用環介導恒溫擴增技術檢測食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-20
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200710150204.3 
  • 技術(專利)名稱 運用環介導恒溫擴增技術檢測食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法 
  • 項目單位 天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心
  • 發明人 張宏偉,趙玉龍,鄭文杰,黃熙泰,趙宏,葉露萌 
  • 行業類別 醫療器械-監護設備
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李賀
  • 發布時間 2021-12-20  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種運用環介導恒溫擴增技術檢測食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法,屬于細菌檢驗技術領域,主要的技術方案是設計了引物組序列,采用環介導恒溫擴增技術進行檢測,其環介導恒溫擴增產物檢測方法包括:(1)10,000×g,5分鐘,室溫,陽性可見在試管底部見到白色沉淀;(2)加入顯色劑,陽性結果成綠色;(3)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,結果有階梯狀電泳條帶;可以選擇以上三種環介導恒溫擴增產物檢測方法中的任意一種方法進行檢測。該方法具有檢測準確、特異性強、靈敏度高的特點,可以快速、準確地鑒定特異的目的細菌,提高了檢測效率,節約了時間,從而解決傳統檢測方法無法滿足進出口貨物日益增長的現狀。
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  • 02

    說明書

    1.一種運用環介導恒溫擴增技術檢測食品中食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法,其特征在于,所使用的引物組序列如下:引物序列一:TCCACTCAGACCCACCAA弓物序列二:ACCGTATCGGCATAACTCATCCTGATACTGCGTGACT引物序列三:TCTTACGACCGCAGCACAT引物序列四:TTGCTTTTTATGTGGGGCTATGGAACTAAGCGGGATGGAA。2.根據權利要求1所述的一種運用環介導恒溫擴增技術檢測食品中食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法,其特征在于,擴增反應體系總體積為25μL,其中各組分構成如下:成分????????????????濃度?????????????加樣量擴增體系預混合物????2×??????????????12.5μL引物序列一??????????10μmol/L????????0.2μL引物序列二??????????10μmol/L????????1.6μL引物序列三??????????10μmol/L????????0.2μL引物序列四??????????10μmol/L????????1.6μLDNA樣品??????????????????????????????2μL雙蒸水???????????????????????????????6.9μL。3.根據權利要求1所述的一種運用環介導恒溫擴增技術檢測食品中食源性小腸結腸炎耶爾森氏菌的方法,其特征在于,環介導恒溫擴增產物檢測方法包括:(1).10,000×g,離心5分鐘,室溫,可在試管底部見到白色沉淀;(2).加入SYBR?Green染料,反應液呈現綠色;(3).1.5%瓊脂糖凝膠電泳,結果有階梯狀電泳條帶;選擇以上三種環介導恒溫擴增產物檢測方法中的任意一種方法進行檢測。
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專利技術附圖

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