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一種以生物胺為特征標志物鑒別蜂毒種類的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-21
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610101614.8 
  • 技術(專利)名稱 一種以生物胺為特征標志物鑒別蜂毒種類的方法 
  • 項目單位 中國農業科學院蜜蜂研究所
  • 發明人 周金慧,李熠,張文文,吳黎明,牛慶生,張金振,金玥,王琳,趙文 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫晟裕
  • 發布時間 2022-01-21  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及生物胺作為特征標志物在鑒別蜂毒種類中的應用,還涉及利用生物胺作為特征標志物采用HPLC/MS/MS手段鑒別蜂毒種類的方法,該方法以組織胺、多巴胺、五羥色胺、腎上腺素、去甲腎上腺素中的一種或多種為特征標志物,能夠精準地用于鑒別意大利蜜蜂蜂毒、王漿高產蜜蜂蜂毒、安納托利亞蜜蜂蜂毒、高加索蜜蜂蜂毒、卡尼鄂拉蜜蜂蜂毒、喀爾巴阡蜜蜂蜂毒中的一種或多種,此種鑒別方法能夠高效、穩定、準確的鑒別六種蜂毒,對于加強蜂毒種類鑒別的研究,探索蜂毒溯源信息,以及開發我國傳統中醫藥物,提高我國蜂毒質量,保證消費者健康具有重要意義。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種以生物胺為特征標志物鑒別蜂毒種類的方法,其特征在于,包括如下步驟:
    (1)配制標準工作液:取適量生物胺標準物質溶于純水中,配制成1ng/mL~1000ng/mL
    不同濃度梯度的多個標準工作液;
    所述生物胺為組織胺、多巴胺、五羥色胺、腎上腺素、去甲腎上腺素;
    (2)制備待測樣品溶液:取適量待測蜂毒樣品溶于水中,渦旋處理后取上清液即得;
    (3)采用HPLC/MS/MS方法檢測待測樣品溶液和標準工作液:采用單點校準或多點校準
    法對蜂毒中的生物胺進行定性分析和定量分析;
    所述HPLC條件為:采用PFP色譜柱;
    流動相:A相:0.1%的甲酸水,B相:甲醇溶液;梯度洗脫條件如下:

    所述MS/MS的檢測參數為:

    2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,按如下方式配制標準工作液:取等量生物
    胺標準物質同時溶于純水中,配制混合標準工作液。
    3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述多個標準工作液為3-10個。
    4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述多個標準工作液為7個。
    5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述標準工作液的濃度梯度分別為1ng/
    mL,5ng/mL,10ng/mL,50ng/mL,100ng/mL,500ng/mL,1000ng/mL。
    6.根據權利要求1-2、4-5任一項所述的方法,其特征在于,所述待測樣品溶液采用如下
    方法制備:每5.0mg樣品加入1-3mL純水,渦旋5-15min,離心后取上清液備用。
    7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述待測樣品溶液采用如下方法制備:每
    5.0mg樣品加入2mL純水,渦旋10min,1000rpm離心后取上清液備用。
    8.根據權利要求1-2、4-5、7任一項所述的方法,其特征在于:所述HPLC還包括如下檢測
    條件:柱溫:25~35℃;流速:0.2~0.5mL/min;進樣量:4.0-6.0μL;
    和/或,所述MS/MS還包括如下檢測條件:霧化器溫度:300~400℃;霧化器流速:5-8L/
    min;霧化器壓力:30~40psi;毛細管電壓:1800~2200V;鞘流氣溫度:320~380℃;鞘流氣
    流速:8~10L/min;錐孔電壓:800~1200V。
    9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于:所述HPLC還包括如下檢測條件:柱溫30℃,
    流速0.3mL/min,進樣量5.0μL;
    和/或,所述MS/MS還包括如下檢測條件:霧化器溫度:350℃;霧化器流速:6L/min;霧化
    器壓力:35psi;毛細管電壓:2000V;鞘流氣溫度:350℃;鞘流氣流速:9L/min;錐孔電壓:
    1000V。
    10.根據權利要求1-2、4、5、7、9任一項所述的方法,其特征在于:所述蜂毒為意大利蜜
    蜂蜂毒、王漿高產蜜蜂蜂毒、安納托利亞蜜蜂蜂毒、高加索蜜蜂蜂毒、卡尼鄂拉蜜蜂蜂毒、喀
    爾巴阡蜜蜂蜂毒中的一種或多種。
    11.根據權利要求8所述的方法,其特征在于:所述蜂毒為意大利蜜蜂蜂毒、王漿高產蜜
    蜂蜂毒、安納托利亞蜜蜂蜂毒、高加索蜜蜂蜂毒、卡尼鄂拉蜜蜂蜂毒、喀爾巴阡蜜蜂蜂毒中
    的一種或多種。
    展開

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