本發(fā)明涉及清開靈注射液中間體及成品中指標成分含量測定方法，其特征在于：采用高效液相色譜法或其它分析方法測定其中各指標成分的含量，采用紫外分光光度法對稀釋后的樣品進行全波長掃描；將樣品分為兩部分：校正集和驗證集，根據(jù)校正集樣品的紫外光譜數(shù)據(jù)及含量，采用化學計量學方法對數(shù)據(jù)進行處理，利用TQAnalyst軟件和Matlab6.5軟件建立數(shù)學模型，將驗證集樣品的紫外光譜數(shù)據(jù)代入數(shù)學模型，比較預測值與真值，驗證該技術的準確可靠。本發(fā)明的方法可用于銀黃液中綠原酸及黃芩苷的含量測定，四混液中梔子苷和總氮的含量測定，可用于對以上成分含量的快速在線檢測；可用于清開靈注射液中間體及成品的含量測定及快速在線檢測。

1.清開靈注射液中間體及成品中指標成分含量的過程分析方法，
其特征在于：采用高效液相色譜法及其它分析方法測定清開靈注射液
中間體及成品中各指標成分的含量，并采用紫外分光光度法對稀釋后
的樣品進行全波長掃描；將樣品分為兩部分，即校正集和驗證集，根
據(jù)校正集樣品的紫外光譜數(shù)據(jù)及含量，采用化學計量學方法對數(shù)據(jù)進
行處理，并利用TQ?Analyst軟件和Matlab?6.5軟件建立數(shù)學模型，
再將驗證集樣品的紫外光譜數(shù)據(jù)代入數(shù)學模型，比較預測值與真值，
驗證該技術的準確可靠。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的清開靈注射
液中間體及成品中指標成分含量的過程分析方法是指：
銀黃液中綠原酸及黃芩苷的含量的測定方法，是采用反相高效液
相色譜法測定銀黃液樣品中綠原酸和黃芩苷的含量，并采用紫外光譜
-化學計量學方法中的偏最小二乘法進行分析和數(shù)據(jù)處理；
上述銀黃液紫外光譜的測定是指：采用HP-8453紫外-可見分
光光度儀，將銀黃液樣品稀釋2000倍，在190～400nm進行掃描，掃
描間隔1nm；
上述采用紫外光譜-偏最小二乘法進行分析和數(shù)據(jù)處理是指：
采用紫外分光光度法對稀釋2000倍的銀黃液樣品進行全波長
掃描，將銀黃液樣品分為兩部分，即校正集和驗證集，根據(jù)校正集樣
品的紫外光譜數(shù)據(jù)及含量，采用偏最小二乘并利用TQ?Analyst軟件
和Matlab?6.5軟件建立數(shù)學模型，再將驗證集樣品的紫外光譜數(shù)據(jù)
代入數(shù)學模型，比較預測值與真值，驗證該技術的準確可靠；
上述運用TQAnalyst軟件是指，分別采用逐步多元線形回歸、主
成分回歸和偏最小二乘法進行數(shù)據(jù)處理，建立UV預測模型，并對模型
進行檢驗，比較結(jié)果；
采用反相高效液相色譜法測定銀黃液樣品中綠原酸和黃芩苷的
含量，是指：
1）采用高效液相色譜儀，上述高效液相色譜儀包括：四元泵、
真空脫氣泵、自動進樣器、柱溫箱、DAD二極管陣列檢測器、HP數(shù)據(jù)
處理工作站；
2）色譜條件：
綠原酸：Agilent?ZORBAX?SB-C18色譜柱：4.6×250mm，5μm；
流動相：甲醇：0.1％甲酸的混合體積比=25∶75；流速1.0mL·min^-1；
檢測波長330nm；柱溫30℃；
黃芩苷：Agilent?ZORBAX?SB-C18色譜柱：4.6×250mm，5μm；流
動相：甲醇：0.1％甲酸的混合體積比=60∶40；流速1.0mL·min^-1；檢
測波長280nm；柱溫30℃；測定銀黃液樣品中綠原酸和黃芩苷的含量。
3.如權利要求1所述的清開靈注射液中間體及成品中指標成分
含量的過程分析方法，所述的清開靈注射液中間體及成品中指標成分
含量的測定方法是指四混液中梔子苷和總氮的含量的測定方法，上述
四混液中梔子苷和總氮的含量測定方法：
所用儀器為：Agilent?1100高效液相色譜儀，包括：四元泵、
真空脫氣泵、自動進樣器、柱溫箱、DAD二極管陣列檢測器、HP數(shù)據(jù)
處理工作站；KDY型定氮儀；
所用試藥為：梔子苷對照品購自中國藥品生物制品鑒定所，四混
液由指定藥廠提供，乙腈為色譜純；
所用方法為：色譜條件：Agilent?ZORBAX?SB-C18色譜柱，4.6
×250mm，5μm；流動相：乙腈-水比例13∶87；流速1.0mL·min^-1；
檢測波長238nm；柱溫30℃；
其中總氮的含量測定按常規(guī)方法進行；
其中四混液紫外光譜的測定方法如下：
所用儀器為：HP-8453紫外-可見分光光度儀；
具體步驟為：將四混液樣品稀釋500倍，在190～400nm進行掃
描，掃描間隔1nm，得到四混液紫外光譜圖；
接著進行數(shù)據(jù)處理：
運用TQ?Analyst軟件，分別采用逐步多元線性回歸、主成分回
歸和偏最小二乘法對四混液的高效液相色譜及凱氏定氮測定結(jié)果和
紫外光譜數(shù)據(jù)進行分析，篩選最佳建模方法；
運用Matlab?6.5軟件，計算模型中的參數(shù)，建立紫外光譜法含
量預測模型，并對模型進行檢驗，比較結(jié)果；將四混液樣品：樣本
數(shù)為32，分為校正集：樣本數(shù)為24，和驗證集：樣本數(shù)為8兩部分，
并使校正集和驗證集樣品中的總氮和梔子苷含量較均勻的分布，并且
驗證集的含量范圍應涵蓋在校正集的含量范圍內(nèi)。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于：對清開靈注射液中間
體之一：四混液中的梔子苷和總氮含量進行快速測定，是先將待測四
混液樣品稀釋500倍，測定樣品的紫外光譜，接著對光譜數(shù)據(jù)進行7
點三次平滑處理，將平滑處理后的數(shù)據(jù)代入梔子苷和總氮的UV-SMLR
定量模型，計算該樣品中梔子苷和總氮的含量。
5.如權利要求2所述的方法，其特征在于：該方法用于清開靈
注射液生產(chǎn)過程中銀黃液樣品中的綠原酸和黃芩苷的含量的測定。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于：該方法用于清開靈注
射液生產(chǎn)過程中銀黃液樣品中的綠原酸和黃芩苷的含量的在線檢測。
7.如權利要求3所述的方法，其特征在于：該方法用于清開靈注
射液生產(chǎn)過程中四混液中梔子苷和總氮的含量的在線檢測。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于：Matlab?6.5軟件建立
數(shù)學模型是指：
運用Mat?lab?6.5軟件，將校正集樣品紫外原始光譜數(shù)據(jù)與高效液
相色譜數(shù)據(jù)代入偏最小二乘PLS程序，計算得到建模參數(shù)P、Q和B，
從而建立了銀黃液的UV-PLS定量模型。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于：運用Matlab?6.5軟
件建立數(shù)學模型是指：
將校正集樣品篩選波長下的紫外原始光譜數(shù)據(jù)與高效液相色譜
及凱氏定氮測試數(shù)據(jù)代人多元線性回歸程序，計算得到建模參數(shù)，包
括偏回歸系數(shù)β₁，β₂，β₃和常數(shù)項β₀，從而建立了四混液的UV-SLMR
定量模型。