本發(fā)明公開了一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒。本發(fā)明利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成過氧化氫，鉑鉍納米模擬過氧化物酶催化過氧化氫氧化3?甲基?2?苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽和N?乙基?N?（2?羥基?3?磺丙基）?3?甲基苯胺鈉鹽偶合顯色，提供了一種快速、簡便、靈敏的葡萄糖檢測新方法。該檢測新方法所用鉑鉍納米模擬過氧化物酶制備簡便易得，可以實現(xiàn)對血清中的葡萄糖進行可視化分析，具有操作簡便、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點，易于推廣使用。

1.一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測方法，其特征是將葡萄糖氧化酶，
葡萄糖溶液，磷酸鹽緩沖液混合，溫浴后加入磷酸鹽緩沖液， 3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽
酸鹽, N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺鈉鹽，鉑鉍納米模擬過氧化物酶水溶液，
溫浴后目視觀察或測定紫外可見吸收；所述的鉑鉍納米模擬過氧化物酶由以下步驟制得
的：在5 mL濃度為50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL 濃度為16 mmol/L氯鉑酸溶
液和0.5 mL 濃度為1.5 mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80 ℃反應(yīng)2 h，反應(yīng)后溶液裝入
截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-納米鉑水
溶液，將牛血清白蛋白-納米鉑水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-納米鉑粉末，在0.6 mL
濃度為23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-鉑水溶液中加入0.6 mL濃度為0.5 mmol/L的硝酸鉍溶
液和1.8 mL濃度為10 mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80 ℃反應(yīng)2.5 h，反應(yīng)后
溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次，得到鉑鉍納米模擬
過氧化物酶的水溶液，將鉑鉍納米模擬過氧化物酶水溶液冷凍干燥得到鉑鉍納米模擬過氧
化物酶粉末。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測方法，其特征是
將80 μL濃度為180 U/mL的葡萄糖氧化酶與640 μL不同濃度的葡萄糖標準溶液，80 μL濃度
為10 mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液混合，37℃溫浴30 min，加入1.3 mL濃度為10 mmol/L，
pH=7的磷酸鹽緩沖液，1 mL濃度為0.5 mmol/L的3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽, 800 μ
L濃度為3 mmol/L的N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺鈉鹽，100 μL濃度為4.76
mg/mL鉑鉍納米模擬過氧化物酶水溶液，37℃溫浴30 min，目視觀察溶液顏色或測定紫外可
見吸收。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測方法，其特征
是顯色產(chǎn)物溶液顏色為紫色，隨著葡萄糖濃度的增大，溶液顏色加深，目視觀察溶液顏色的
檢測限為5 μmol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測方法，其特征
是顯色產(chǎn)物最大吸收波長為590 nm，根據(jù)590 nm波長處測得的吸光度作標準曲線，其檢測
的線性范圍為1~100 μmol/L，檢測限為0.2 μmol/L。
5.一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒，其特征是試劑盒中包括a
液、b液、標準液、酶液和樣品稀釋液，所述a液中含有3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽和
N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺鈉鹽，b液中含有鉑鉍納米模擬過氧化物酶溶
液，標準液為葡萄糖標準溶液，酶液為葡萄糖氧化酶溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒，其
特征是a液中含有濃度為0.28 mmol/L 的3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽和濃度為1.33
mmol/L的N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺鈉鹽；b液中含有用10 mmol/L，pH=7的
磷酸鹽緩沖液配制的濃度為0.34 mg/mL的鉑鉍納米模擬過氧化物酶溶液；標準液包括濃度
為6.25，31.25，62.5，125，250，375，500，625 μmol/L的葡萄糖溶液；酶液包括用10 mmol/L，
pH=7的磷酸鹽緩沖液配制的濃度為90 U/mL的葡萄糖氧化酶溶液；樣品稀釋液包括10
mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒，
其特征是所述的鉑鉍納米模擬過氧化物酶由以下步驟制得的：在5 mL濃度為50 mg/mL的牛
血清白蛋白水溶液中加入5 mL 濃度為16 mmol/L氯鉑酸溶液和0.5 mL 濃度為1.5 mol/L
氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80 ℃反應(yīng)2 h，反應(yīng)后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000
r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-納米鉑水溶液，將牛血清白蛋白-納米鉑水
溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-納米鉑粉末，在0.6 mL濃度為23.8 mg/mL的牛血清白蛋
白-鉑水溶液中加入0.6 mL濃度為0.5 mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8 mL濃度為10 mmol/L，pH
=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80 ℃反應(yīng)2.5 h，反應(yīng)后溶液裝入截止分子量為3k的超濾
管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次，得到鉑鉍納米模擬過氧化物酶的水溶液，將鉑鉍納米
模擬過氧化物酶水溶液冷凍干燥得到鉑鉍納米模擬過氧化物酶粉末。
8.權(quán)利要求5-7任一所述的一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒的
應(yīng)用，其特征是作為葡萄糖檢測。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種基于鉑鉍納米模擬過氧化物酶的葡萄糖檢測試劑盒的應(yīng)
用，其特征是在640 μL標準液中加入160 μL酶液，37℃溫浴30 min，加入1.8 mL a液和1.4
mL b液，37℃溫浴30 min，測定590 nm處的吸光度，繪制葡萄糖標準曲線或計算回歸方程；
在40 μL人血清樣品中加入600 μL樣品稀釋液，160 μL酶液，37℃溫浴30 min，加入1.8 mL
a液和1.4 mL b液， 37℃溫浴30 min，測定590 nm處的吸光度，根據(jù)標準曲線或回歸方程，
計算血清樣品中葡萄糖的含量。