1.定性和定量測定植物活性多糖高效液相色譜-串聯質譜法，其特征在于包
括以下步驟：
(1)樣品前處理：
A.固體樣品：將樣品與超純水按10mg：1ml混合，充分搖勻，制成待檢
樣液；
B.液體樣品：將樣品充分混勻后得到待檢樣液；
(2)衍生化：將待檢樣液、混合多糖溶液以及標準葡萄糖溶液用3-氨基-9-
乙基咔唑分別進行衍生化處理；
(3)質譜定性：以AEC衍生化的混合多糖溶液為參照，對AEC衍生化的
待檢樣液進行質譜離子碎片峰的確證，確定還原性多糖的聚合度，對待檢樣液
中所含還原性聚合多糖的種類進行定性；
(4)HPLC定量：對AEC衍生化的待檢樣液和AEC衍生化的標準葡萄糖
溶液分別進行高效液相色譜分析；用AEC衍生化的標準葡萄糖溶液作為參比，
分析制作標準葡萄糖曲線，以此對待檢樣液中各類還原性聚合多糖進行間接定
量；
步驟(1)中所述的樣品中的目標檢測物為植物或植物提取物中的多糖；
步驟(3)中所述的質譜定性的條件為液相色譜質譜條件，具體如下：流動
相的比例為水相和有機相按體積比70:30配比，其中水相為含0.1mol/L乙酸銨
的水溶液，經0.45μm水相濾膜過濾，有機相為純乙腈；色譜柱為Waters?C18；
流速為0.4mL/min；柱溫為40℃；進樣量為5～20μL；檢測波長為254nm；
質譜條件：離子化模式為電噴霧離子化；掃描模式為正離子Q1全掃描；離
子掃描范圍為m/z350～1500；
步驟(4)中所述的高效液相色譜分析的條件為：流動相的比例為水相和有
機相按體積比70:30配比，其中水相為含0.1mol/L乙酸銨的水溶液，經0.45μm
水相濾膜過濾，有機相為純乙腈；色譜柱為Waters?C18；流速為0.4mL/min；柱
溫為40℃；進樣量為5～20μL；檢測波長為254nm。
2.根據權利要求1所述的定性和定量測定植物活性多糖高效液相色譜-串聯
質譜法，其特征在于：步驟(2)中所述的混合多糖為Dextran?Standard?DXT1K?
Mw1200。
3.根據權利要求1所述的定性和定量測定植物活性多糖的高效液相色譜-
串聯質譜方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的3-氨基-9-乙基咔唑衍生化處理的具體步驟如下：
①將3-氨基-9-乙基咔唑溶解于甲醇中，3-氨基-9-乙基咔唑的終濃度
0.04mol/L，得到AEC甲醇溶液；
②用水配制氰基硼氫化鈉，得到濃度為0.2mol/L的氰基硼氫化鈉溶液；
③分別在待檢樣液、混合多糖溶液和標準葡萄糖溶液中加入步驟①制備的
AEC甲醇溶液、步驟②制備的0.2mol/L的氰基硼氫化鈉溶液和冰醋酸，其中待
檢樣液、混合多糖溶液和標準葡萄糖分別同AEC甲醇溶液、氰基硼氫化鈉溶液
和冰醋酸的體積比為10:10:10:3；混勻，于70℃水浴加熱1h，冷卻后加入水，
搖勻后，用氯仿進行洗滌，離心，取水相，得到AEC衍生化的待檢多糖樣液、
AEC衍生化的混合多糖溶液和AEC衍生化的標準葡萄糖溶液。
4.根據權利要求3所述的定性和定量測定植物活性多糖高效液相色譜-串聯
質譜法，其特征在于：
步驟③中所述的混合多糖溶液的濃度為0.01mol/L；
步驟③中所述的標準葡萄糖溶液的濃度為0.01mol/L；
步驟②和③中所述的水為超純水；
步驟③中所述的洗滌的次數為2～3次；
步驟③中所述的離心的條件為5000rpm/min離心5min；
步驟③中所述的水相通過過濾純化。
5.根據權利要求4所述的定性和定量測定植物活性多糖高效液相色譜-串聯
質譜法，其特征在于：所述的過濾的條件為使用0.45μm濾膜過濾。
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