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基于EBFC的自供能細菌生物傳感器及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-01
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201811075816.5 
  • 技術(專利)名稱 基于EBFC的自供能細菌生物傳感器及其應用 
  • 項目單位 青島農業大學
  • 發明人 李峰,蓋盼盼,于汶,谷成成,侯婷 
  • 行業類別 智慧健康-互聯網+平臺
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 許虹霞
  • 發布時間 2022-02-01  
  • 01

    項目簡介

    本發明構建了一種基于EBFC的自供能細菌生物傳感器及其應用,屬于生物傳感技術領域。PB可以接收到來自生物陽極的電子轉化為普魯士白(prussian white,PW),而PB的藍色也可以通過得到電子轉化為透明的PW。從藍色到無色的變化速度取決于副溶血性弧菌的濃度。這種顏色可以通過將其連接到生物陽極上而恢復到原來的PB狀態。當目標副溶血性弧菌存在時,EBFCs產生的開路電壓隨之降低,其振幅依賴于對目標的適配體識別的副溶血性弧菌濃度。副溶血性弧菌由于空間位阻效應阻止了燃料葡萄糖接近生物陽極上葡萄糖脫氫酶(GDH)活性位點,導致普魯士白的顏色減少。本發明實現對food pathogens簡單、方便、快速、靈敏、高效檢測。
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  • 02

    說明書

    1.一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,所述基于EBFC的自供能細菌生物傳感器包括陽極、PB電極、陰極和電解液;所述陽極為MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極,所述陰極為BOD/CNTs/CP生物陰極,所述電解液為含1~3mM NAD+/NADH、3~6mM葡萄糖,pH 6.0的0.1M PB緩沖體系;所述MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極的制備方法包括如下步驟:對修飾有CNT/AuNPs的CP電極表面進行循環伏安掃描聚合上硫堇,電極用含有GDH溶液和適配體SH-DNA的混合物涂覆,一次孵育,獲得aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP;二次水沖洗電極表面,向電極表面滴加MCH溶液,二次孵育,進行封板,二次水沖洗電極表面,得到MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極;所述檢測食物中致病菌的方法包括如下步驟:步驟(1):將MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極、PB電極、含1~3mM NAD+/NADH、3~6mM葡萄糖,pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池,測量電池的E1OCV,E1OCV為生物陽極與PB電極之間的開路電壓,記為E10OCV;將BOD/CNT/CP生物陰極、PW電極、含1~3mM NAD+/NADH、3~6mM葡萄糖pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池,測量電池的E2OCV,E2OCV為PW電極與生物陰極之間的開路電壓,記為E20OCV;步驟(2):將MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極置于0.5~2mL不同濃度的致病菌,在37℃孵育60~120分鐘,得到pathogens/MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極,二次水沖洗電極表面;步驟(3):pathogens/MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極、PB電極、含1~3mM NAD+/NADH、3~6mM葡萄糖,pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池,測量電池的E1OCV,記為E1nOCV;將BOD/CNT/CP生物陰極、PW電極、含pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池,測量電池的E2OCV,記為E2nOCV,觀察PB電極的顏色變化。2.根據權利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,其特征在于,所述GDH和適配體濃度分別為1~4mg mL-1和400~700nM,混合物滴涂量為25~60μL。3.根據權利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,其特征在于,所述對電極表面進行循環伏安掃描聚合硫堇的掃速為30-70mv s-1,所述硫堇溶于2.2mM乙酸溶液中,使硫堇濃度為1~3mM。4.根據權利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,其特征在于,MCH溶液為20~50μL、1~3mM的MCH溶液。5.根據權利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,其特征在于,所述一次孵育的條件為3~7℃孵育8~16h。6.根據權利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法,其特征在于,所述二次孵育的條件為室溫孵育0.5~2h。
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專利技術附圖

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