1.一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，包括如下步驟：
（1）將熒光蛋白基因插入噬菌體DNA的克隆位點前并使熒光蛋白基因的表達閱讀框架
與噬菌體DNA一致；
（2）用此重組噬菌體DNA去克隆抗原基因或基因片段；
（3）重組噬菌體基因在寄主細菌中表達；
（4）將表達的重組噬菌體點在生物芯片上或其它承載介質上；
（5）將點好樣的生物芯片與血清抗體雜交；
（6）加入標記的血清抗體的抗體；
（7）讀取信號及數據分析。
2.如權利要求1所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特征在于：所述
步驟（1）的方法包括：將熒光蛋白基因連接上適當的粘連序列；再將噬菌體DNA和熒
光蛋白基因用適當的酶酶切；將熒光蛋白基因插入噬菌體DNA。
3.如權利要求1所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特征在于：熒光
蛋白包括綠色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、紅色熒光蛋白，及其增強型衍生體及其它衍
生體，以及其它有自身發熒光功能的蛋白。
4.如權利要求1所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特征在于：所述
噬菌體包括單鏈絲狀噬菌體、λ噬菌體、T4噬菌體或T7噬菌體。
5.如權利要求1所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特征在于：所述
的寄主細菌為大腸桿菌。
6.如權利要求5所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特征在于：寄主
細菌為大腸桿菌BLT5615。
7.如權利要求1、2、3、4或5所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，其特
征在于：所述生物芯片包括蛋白生物芯片微陣列，生物液體芯片微陣列。
8.一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法，包括如下步驟：
（1）制備與增強綠色熒光蛋白（EGFP）基因融合的T7噬菌體載體：
用如下一對包裹EGFP核苷酸序列的PCR引物：
正向5’CTTCAGAATTCCAGTATGGTGAGCAAGGGCGA3’
反向5’TCAGTAAGCTTCACTTTACTTGTACAGCTCGTCCATG3’
從質粒載體pEGFP擴增出EGFP的核苷酸序列；擴增出來的EGFP核苷酸序列中，正
向5’末端含一個EcoR?I切點，3’末端含一個Hind?III切點，利用這兩個切點與T7
噬菌體載體的EcoR?I和Hind?III配合將EGFP核苷酸序列插入T7噬菌體；
（2）T7噬菌體cDNA文庫轉成熒光蛋白基因融合T7噬菌體cDNA文庫：
（3）制備抗原蛋白芯片、抗原蛋白芯片與血清樣本群體印跡雜交反應；
（4）信號檢測。
9.如權利要求1所述的一種噬菌體展示抗原克隆生物標志物的方法的用途，其應用于以
噬菌體為載體的，以包括傳統ELISA，生物芯片微陣列為基礎的蛋白生物標志物技術
上。
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