描述了一種使用不可濾出的或可擴(kuò)散的氧化還原介質(zhì)的傳感器。該傳感器包括一個容納樣品使之與工作電極電解接觸的樣品室，并且至少在某些情況中，該傳感器也含有不可濾出的或可擴(kuò)散的第二種電子轉(zhuǎn)移劑。該傳感器和/或所用的方法因應(yīng)分析物產(chǎn)生傳感器信號，其能與介質(zhì)引起的本底信號區(qū)分。本發(fā)明能用于使用如庫侖分析法、電流分析法和電勢分析法的技術(shù)測定生物流體如血液或血清中生物分子如葡萄糖或乳酸的濃度。能催化生物分子電氧化或電還原的酶一般用作第二種電子轉(zhuǎn)移劑。

1.一種用于確定樣品中葡萄糖濃度的方法，其包括步驟：
(a)使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，所述電化學(xué)傳感器包括：
(i)一個包括工作電極和對電極的電極對，其中工作電極和對電極
分開25μm至1000μm范圍內(nèi)的最近距離；
(ii)與工作電極和對電極相鄰的測定區(qū)，其中所述測定區(qū)的大小
可含有體積不超過約1μL的樣品；和
(iii)位于測定區(qū)中的葡萄糖反應(yīng)性酶和一種氧化還原介質(zhì)；
(b)在不超過約5分鐘的測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信
號，其中氧化還原介質(zhì)產(chǎn)生的本底信號不超過5mM葡萄糖氧化或還原產(chǎn)
生的信號的5倍；和
(c)用傳感器信號確定葡萄糖濃度。
2.權(quán)利要求1的方法，其包括在測定區(qū)內(nèi)以非流過方式保存樣本。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述氧化還原介質(zhì)是可擴(kuò)散介質(zhì)。
4.權(quán)利要求1的方法，其中使樣品與電化學(xué)傳感器接觸的步驟包括
使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，其中工作電極和對電極分開200至400μm
的最近距離。
5.權(quán)利要求2的方法，其中使樣品與電化學(xué)傳感器接觸的步驟包括
使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，其中位于測定區(qū)中的氧化還原介質(zhì)在測定
期間在工作電極和對電極之間穿梭平均不超過1次。
6.權(quán)利要求5的方法，其中使樣品與電化學(xué)傳感器接觸的步驟包括
使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，其中位于測定區(qū)中的氧化還原介質(zhì)在測定
期間在工作電極和對電極之間穿梭平均不超過0.1次。
7.權(quán)利要求1的方法，其中使樣品與電化學(xué)傳感器接觸的步驟包括
使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，其中所述電極對的工作電極位于第一個基
底上，且對電極位于該第一基底上。
8.權(quán)利要求1的方法，其中用傳感器信號確定葡萄糖濃度的步驟包
括經(jīng)電流分析法用傳感器信號確定葡萄糖的濃度。
9.權(quán)利要求1的方法，其中用傳感器信號確定葡萄糖濃度的步驟包
括經(jīng)庫侖法用傳感器信號確定葡萄糖的濃度。
10.權(quán)利要求1的方法，其中用傳感器信號確定葡萄糖濃度的步驟
包括經(jīng)電勢分析法用傳感器信號確定葡萄糖的濃度。
11.權(quán)利要求1的方法，其中用傳感器信號確定葡萄糖濃度的步驟
包括經(jīng)伏安法用傳感器信號確定葡萄糖的濃度。
12.權(quán)利要求1的方法，其中在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感
器信號的步驟包括在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信號，其中氧
化還原介質(zhì)產(chǎn)生的本底信號與5mM葡萄糖氧化或還原產(chǎn)生的信號相同或
小于5mM葡萄糖氧化或還原產(chǎn)生的信號。
13.權(quán)利要求1的方法，其中在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感
器信號的步驟包括在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信號，其中氧
化還原介質(zhì)產(chǎn)生的本底信號不超過5mM葡萄糖氧化或還原產(chǎn)生的信號的
25％。
14.權(quán)利要求1的方法，其中在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感
器信號的步驟包括在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信號，其中氧
化還原介質(zhì)產(chǎn)生的本底信號不超過5mM葡萄糖氧化或還原產(chǎn)生的信號的
5％。
15.一種用于確定樣品中葡萄糖濃度的方法，其包括步驟：
(a)使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，所述電化學(xué)傳感器包括：
(i)一個工作電極和一個對電極，其中工作電極和對電極分開25μm
至1000μm范圍內(nèi)的最近距離；
(ii)與工作電極和對電極相鄰的測定區(qū)，其中所述測定區(qū)的大小
可含有體積不超過約1μL的樣品；和
(iii)位于測定區(qū)中的葡萄糖反應(yīng)性酶和一種氧化還原介質(zhì)；
(b)在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信號，其中氧化還原介
質(zhì)產(chǎn)生的本底信號不超過平均正常生理量的葡萄糖氧化或還原產(chǎn)生的信
號的5倍；和
(c)經(jīng)電流分析法用傳感器信號確定葡萄糖濃度。
16.權(quán)利要求15的方法，其包括在測定區(qū)內(nèi)以非流過方式保存樣本。
17.權(quán)利要求15的方法，其中所述氧化還原介質(zhì)是可擴(kuò)散介質(zhì)。
18.權(quán)利要求15的方法，其中所述測定區(qū)的大小可含有體積不超過
約0.5μL的樣品。
19.權(quán)利要求15的方法，其中使樣品與電化學(xué)傳感器接觸的步驟包
括使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，其中工作電極和對電極分開200至400μm
的最近距離。
20.一種用于確定樣品中分析物濃度的方法，其包括步驟：
(a)使樣品與電化學(xué)傳感器接觸，所述電化學(xué)傳感器包括：
(i)一個包括工作電極和對電極的電極對，其中工作電極和對電極
分開25μm至1000μm范圍內(nèi)的最近距離；
(ii)與工作電極和對電極相鄰的測定區(qū)，其中所述測定區(qū)的大小
可含有體積不超過約1μL的樣品；和
(iii)位于測定區(qū)中的一種分析物反應(yīng)性酶和一種氧化還原介質(zhì)；
(b)在測定時間內(nèi)在工作電極處產(chǎn)生傳感器信號，其中氧化還原介
質(zhì)產(chǎn)生的本底信號不超過平均正常生理量的分析物氧化或還原產(chǎn)生的信
號的5倍；和
(c)用傳感器信號確定分析物濃度。
21.權(quán)利要求20的方法，其包括在測定區(qū)內(nèi)以非流過方式保存樣本。
22.權(quán)利要求20的方法，其中所述氧化還原介質(zhì)是可擴(kuò)散介質(zhì)。
23.權(quán)利要求20的方法，其中用傳感器信號確定分析物濃度的步驟
包括經(jīng)電流分析法用傳感器信號確定分析物的濃度。
24.權(quán)利要求20的方法，其中用傳感器信號確定分析物濃度的步驟
包括經(jīng)庫侖法用傳感器信號確定分析物的濃度。
25.權(quán)利要求20的方法，其中用傳感器信號確定分析物濃度的步驟
包括經(jīng)電勢分析法用傳感器信號確定分析物的濃度。
26.權(quán)利要求20的方法，其中用傳感器信號確定分析物濃度的步驟
包括經(jīng)伏安法用傳感器信號確定分析物的濃度。
27.權(quán)利要求20的方法，其中所述測定區(qū)的大小可含有體積不超過
約0.5μL的樣品。
28.權(quán)利要求20的方法，其中所述測定區(qū)的大小可含有體積不超過
約0.2μL的樣品。
29.權(quán)利要求20的方法，其中所述測定區(qū)的大小可含有體積不超過
約0.1μL的樣品。