本發(fā)明屬生物檢測(cè)領(lǐng)域。黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：包括紙板，紙板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測(cè)墊、金標(biāo)墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，所述檢測(cè)墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上自上而下設(shè)置橫向質(zhì)控線和檢測(cè)線，所述檢測(cè)線包被有黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(AFM1-BSA)，質(zhì)控線包被有兔抗鼠多克隆抗體；所述金標(biāo)墊橫向噴涂有納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體，所述抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體由保藏號(hào)為CCTCC NO.C201018的雜交瘤細(xì)胞株2C9產(chǎn)生。該試紙條用于檢測(cè)黃曲霉毒素M1，具有檢測(cè)快速、操作簡(jiǎn)單、靈敏度高的特點(diǎn)。

1.黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：包括紙板，紙板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測(cè)墊、金標(biāo)墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，所述檢測(cè)墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上自上而下設(shè)置橫向質(zhì)控線和檢測(cè)線，所述檢測(cè)線包被有黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白偶聯(lián)物，質(zhì)控線包被有兔抗鼠多克隆抗體；所述金標(biāo)墊橫向噴涂有納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體，所述抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體由保藏號(hào)為CCTCC?NO.?C201018的雜交瘤細(xì)胞株2C9產(chǎn)生。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：所述的吸水墊長(zhǎng)16～18mm，寬2～4mm；檢測(cè)墊長(zhǎng)25～30mm，寬2～4mm；金標(biāo)墊長(zhǎng)6～9mm，寬2～4mm；樣品墊長(zhǎng)12～18mm，寬2～4mm，相鄰各墊的交疊長(zhǎng)度為1～3mm。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：所述檢測(cè)墊上的檢測(cè)線與硝酸纖維素膜上沿的間距為15～20mm，質(zhì)控線和檢測(cè)線的間距為5～10mm。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：所述檢測(cè)墊上每厘米檢測(cè)線所需的黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白偶聯(lián)物的包被量為75～375ng；每厘米質(zhì)控線所需的兔抗鼠多克隆抗體的包被量為50～500ng。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條，其特征在于：所述金標(biāo)墊中所用的納米金的粒徑為15～20nm；所述金標(biāo)墊上每厘米噴涂長(zhǎng)度所需的納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體的用量為200～600ng。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：(1)吸水墊的制備將吸水紙剪裁即得吸水墊；(2)檢測(cè)墊的制備檢測(cè)線的包被：將黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白的偶聯(lián)物配制成0.1～0.5mg/mL的包被液A；于距離硝酸纖維素膜上沿為15～20mm的位置，用點(diǎn)噴方式將包被液A橫向包被于硝酸纖維素膜上得到檢測(cè)線，每厘米檢測(cè)線上所需黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白的偶聯(lián)物的包被量為75～375ng，然后于37～40℃條件下干燥5～20分鐘；質(zhì)控線的包被：將兔抗鼠多克隆抗體配制成0.1～0.5mg/mL的包被液B；于距檢測(cè)線5～10mm的位置，用點(diǎn)噴方式將包被液B橫向包被于硝酸纖維素膜上，得到質(zhì)控線，每厘米質(zhì)控線上所需兔抗鼠多克隆抗體的包被量為50～500ng，然后于37～40℃條件下干燥5～20分鐘；(3)樣品墊的制備將玻璃纖維膜放入封閉液A中浸濕，取出，于37～40℃條件下干燥4～10小時(shí)，得樣品墊，然后置干燥器中室溫保存；(4)金標(biāo)墊的制備將玻璃纖維膜放入封閉液B中浸濕，取出，于37～40℃條件下干燥4～10小時(shí)，于已干燥的玻璃纖維膜上，用點(diǎn)噴方式將納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體溶液橫向進(jìn)行噴涂，每厘米噴涂長(zhǎng)度所需納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體為200～600ng，然后真空冷凍干燥2～6h，置干燥器中室溫保存；所述的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體由保藏號(hào)為CCTCC?NO.?C201018的雜交瘤細(xì)胞株2C9產(chǎn)生；(5)試紙條的組裝在紙板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測(cè)墊、金標(biāo)墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，交疊長(zhǎng)度為1～3mm，即得黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條；其中：所述的包被液A是按照下述方法配制得到的：將10～50mg市售黃曲霉毒素M1-牛血清白蛋白偶聯(lián)物，1～2g牛血清白蛋白，0.02～0.05g疊氮化鈉，0.8g氯化鈉，0.29g十二水磷酸氫二鈉，0.02g氯化鉀，0.02g磷酸二氫鉀，加水定容至100mL所得；所述的包被液B是按照下述方法配制得到的：將10～50mg兔抗鼠多克隆抗體，0.02～0.05g疊氮化鈉，0.8g氯化鈉，0.29g十二水磷酸氫二鈉，0.02g氯化鉀，0.02g磷酸二氫鉀，加水定容至100mL所得；所述的封閉液A?是按照下述方法配置得到的：將1～2g牛血清白蛋白，2～5g蔗糖，0.02～0.05g疊氮化鈉，0.8g氯化鈉，0.29g十二水磷酸氫二鈉，0.02g氯化鉀，0.02g磷酸二氫鉀，加水定容至100mL所得；所述的封閉液B是按照下述方法配制得到的：將1～2g牛血清白蛋白，0.1～0.2mL曲拉通X-100，0.3～05g聚乙烯吡咯烷酮，2～5g蔗糖，0.02～0.05g疊氮化鈉，0.8g氯化鈉，0.29g十二水磷酸氫二鈉，0.02g氯化鉀，0.02g磷酸二氫鉀，加水定容至100mL所得。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于：所述納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體溶液的標(biāo)記方法為：取50.0mL市售質(zhì)量濃度為0.01%的納米金溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值為5.5；在攪拌的狀態(tài)下緩慢加入2.5mL?0.1mg/mL的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體水溶液，繼續(xù)攪拌30min；加入質(zhì)量濃度為10%牛血清白蛋白水溶液至牛血清白蛋白的終質(zhì)量濃度為1%，繼續(xù)攪拌30min；于4℃放置2h后，1500r/min離心15min，取上清液，棄沉淀；將上清液12000r/min離心30?min，棄去上清液，加入50.0mL標(biāo)記洗滌保存液；再以12000r/min離心30?min，棄去上清液，將沉淀用標(biāo)記洗滌保存液重懸，得到5.0mL濃縮物，置4℃冰箱備用，其中納米金標(biāo)記的抗黃曲霉毒素M1單克隆抗體溶液的質(zhì)量濃度為0.05mg/mL；所述的標(biāo)記洗滌保存液是按照下述方法配制得到的：2.0g聚乙二醇20000，0.2g疊氮鈉，0.1235克硼酸，純水定容至1000mL，0.22μm濾膜過(guò)濾所得。8.一種權(quán)利要求1或2所述的黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條的應(yīng)用，其特征在于：取1mL待測(cè)液態(tài)牛乳及其制品，加入0.25～0.5mL水，混勻，得到樣品溶液，取100μL已稀釋好的樣品溶液做為檢測(cè)液逐滴滴加到一黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條的樣品墊，將其作為檢測(cè)試紙條，同時(shí)取1mL不含黃曲霉毒素M1的空白牛奶樣品，加0.25～0.5mL水，混勻，得到陰性對(duì)照溶液，取100μL陰性對(duì)照溶液，逐滴滴加到另一黃曲霉毒素M1免疫層析試紙條的樣品墊，將其作為對(duì)照試紙條，15分鐘后讀取結(jié)果；檢測(cè)結(jié)果：（1）陽(yáng)性：當(dāng)檢測(cè)試紙條的質(zhì)控線顯示出紅色線條，而檢測(cè)線不顯色時(shí)，或者質(zhì)控線顯示出紅色線條，而檢測(cè)線顏色比對(duì)照試紙條檢測(cè)線顏色淺時(shí)，判為陽(yáng)性，表明待測(cè)樣品中黃曲霉毒素M1的含量高于或等于0.5ng/mL；(2)陰性：當(dāng)檢測(cè)試紙條的質(zhì)控線和檢測(cè)線均顯示出紅色線條，并且檢測(cè)線顏色與對(duì)照試紙條檢測(cè)線顏色接近時(shí)，判為陰性結(jié)果，表明待測(cè)樣品中黃曲霉毒素M1的含量低于0.5ng/mL；(3)無(wú)效：當(dāng)質(zhì)控線不顯色時(shí)，無(wú)論檢測(cè)試紙條的檢測(cè)線顯示或不顯示紅色線條，該試紙條判為無(wú)效。