本發(fā)明公開了一種副結(jié)核熒光PCR快速診斷試劑盒，更具體地說是采用熒光PCR技術(shù)原理快速檢測副結(jié)核病病原菌——副結(jié)核分枝桿菌的方法和試劑盒，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。一組檢驗副結(jié)核病毒的核苷酸序列，其特征在于：是序列表SEQ ID No.1至序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列。本發(fā)明的優(yōu)點是：(1)特異性好，實時熒光PCR技術(shù)通過引物或和探針的特異性雜交對模板進行鑒別，具有很高的準確性，假陽性低；(2)靈敏度高，采用靈敏的熒光檢測系統(tǒng)對熒光信號進行實時監(jiān)控；(3)操作簡單，自動化程度高，不需要傳統(tǒng)PCR擴增后的產(chǎn)物電泳檢測等步驟；(4)不易污染，閉管擴增，不需要開蓋，交叉污染和污染環(huán)境機會少。

1.一組檢驗副結(jié)核病毒的核酸，其特征在于：是序列表SEQ?ID?No.1至序列表SEQ?ID?No.3所示的核酸，其中：SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2為檢驗副結(jié)核分枝桿菌的引物對，SEQ?ID?No.3為檢驗副結(jié)核分枝桿菌的探針序列。2.一種副結(jié)核熒光PCR快速診斷試劑盒，其特征在于包括：1)PCR反應(yīng)液，含：1×PCR緩沖液；0.2μmol/L引物I；0.2μmol/L引物II，0.1μmol/L探針；200μmol/L?d?NTP，MgCl₂2.5mmol/L；2)Taq酶5U/μl；3)陰性對照：生理鹽水；4)陽性對照：攜帶有擴增產(chǎn)物的質(zhì)粒DNA；反應(yīng)液中的引物I為SEQ?ID?No.1所示的核苷酸序列，引物II為SEQ?ID?No.2所示的核苷酸序列，探針為SEQ?ID?No.3所示的核苷酸序列，陽性對照的擴增產(chǎn)物為SEQID?No.4所示的核苷酸序列；所述探針5’端標記FAM、HEX、TET、JOE、ROX或VIC熒光染料，探針3’端標記TAMARA、Elcipse或BHQ淬滅標記。