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一種基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-30
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410768138.6 
  • 技術(專利)名稱 一種基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法 
  • 項目單位 中國科學院大連化學物理研究所
  • 發明人 秦建華,蘇文濤,姜雷,李艷峰 
  • 行業類別 醫療器械-醫療實驗室
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣唯
  • 發布時間 2022-01-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法。所述微流控芯片為4層膜結構,分別為液路層、氣路控制層、和磁鐵控制層和玻璃基底層四部分;所述氣體控制層位于液路層下方,所述基底層位于氣體控制層下方;所述磁鐵控制層位于基底層下方。該方法以微泵閥控制的微流控芯片為平臺,利用微泵閥控制進氣和抽氣,從而實現血液樣品、磁珠、清洗液和洗脫液的引入、混合,非DNA雜質的清洗直至DNA收集過程。該方法將血液樣品DNA純化的全過程集中到單個芯片上進行。另外,該方法具有快速、多通量、無人工操作等優勢。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法,其特征在于,采用微流
    控芯片,按照以下步驟進行:
    (A)引入血液樣本;
    (B)引入用于DNA純化的超順硅珠;
    (C)通入細胞裂解液對引入的細胞樣品進行裂解,得到含核酸物質的細胞裂解液;
    (D)從細胞裂解液中提取純化DNA;
    所述微流控芯片,利用集成有氣動泵閥的微流控芯片作為平臺,通過操作氣動微閥控
    制下述內容之一或其組合:樣品的引入、樣品的混合及核酸樣品的收集;
    所述微流控芯片為4層膜結構,分別為液路層、氣路控制層、和磁鐵控制層和玻璃基底
    層四部分;所述氣路控制層位于液路層下方,所述基底層位于氣路控制層下方;所述磁鐵控
    制層位于基底層下方;
    所述液路層包括上樣緩沖液、磁珠、清洗液、DNA洗脫液入口,液體通道,流通池,樣品
    池,儲液池,儲樣池,DNA收集池,廢液池,加入樣品池的樣品進入儲樣池;加入上樣緩沖液、
    磁珠、清洗液、DNA洗脫液入口的液體在流通池產生的負壓下,經液體通道進入儲液池,與儲
    樣池的樣品混合進入DNA收集池,廢液池收集每一步產生的多余液體;
    所述的氣路控制層含有14個氣閥,所述氣閥由進氣口、氣體通道、氣動微閥構成;氣動
    微閥分別位于液體通道和儲液池下方通過氣動微閥控制液體通道的開關;
    所述的磁鐵控制層含有磁鐵放置區域,磁鐵放置區域的位置與儲液池和儲樣池相對
    應;
    所述的氣動微閥由液路層1a和氣路控制層1b之間的PDMS薄膜構成;液路層1a和氣路控
    制層1b之間只通過氣動微閥相聯系,二者內部并不連通;
    所述的14個氣閥,具體分布和描述如下:
    1#氣閥,2#氣閥,3#氣閥,4#氣閥和6#氣閥具1個呈細長方形的氣動微閥,1#氣閥,2#氣
    閥,3#氣閥,4#氣閥的氣動微閥位于上樣緩沖液、磁珠、清洗液、DNA洗脫液入口的液體通道
    下方、6#氣閥的氣動微閥位于流通池的液體通道下方,控制相應液體通道開關;
    7#氣閥,8#氣閥,10#氣閥,12#氣閥,13#氣閥,14#氣閥具4個呈細長方形的氣動微閥,氣
    動微閥分別位于四個混合區域的液體通道下方,可同時控制四個混合區域的液體通道開
    關,其中7#氣閥控制進入儲液池前的液體通道,8#氣閥控制樣品池至儲樣池之間的液體通
    道,10#氣閥控制儲液池至儲樣池之間的液體通道,12#氣閥控制儲樣池至DNA收集池之間的
    液體通道,13#氣閥控制儲液池至廢液池之間的液體通道,14#氣閥控制儲樣池至廢液池之
    間的液體通道;
    5#氣閥具1個呈圓形的氣動微閥,位于流通池的下方,產生負壓提供液體在液體通道中
    流動的動力;
    9#氣閥和11#氣閥具4個呈正方形的氣動微閥,氣動微閥分別位于四個混合區域儲液
    池、儲樣池的下方,控制液體進出儲液池和儲樣池。
    2.按照權利要求1所述的基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法,其特
    征在于操作步驟A,血液樣本的引入的具體過程包括:樣品池4加血液樣本,氣動泵閥在8#氣
    閥16和11#氣閥19進氣口抽氣,血液樣本進入儲樣池6。
    3.按照權利要求1所述的基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法,其特
    征在于操作步驟B和C中超順硅珠和細胞裂解液引入的具體過程包括:在上樣緩沖液、磁珠、
    清洗液、DNA洗脫液入口1加入超順硅珠和細胞裂解液,開動氣動泵閥在7#氣閥15和9#氣閥
    17進氣口抽氣,超順硅珠細胞裂解液進入儲液池5,開動氣動泵閥在10#氣閥18和11#氣閥19
    進氣口抽氣,超順硅珠細胞裂解液進入儲樣池6,與血液樣本混合。
    4.按照權利要求1所述的基于微流控芯片的快速多通量提取血液樣本DNA的方法,其特
    征在于所述操作步驟D中進行血液樣本DNA的純化,具體過程為:在磁鐵放置區域28放置磁
    鐵,以固定超順硅珠,在上樣緩沖液、磁珠、清洗液、DNA洗脫液入口1加入樣品清洗液,樣品
    洗脫液,開動氣動泵閥在7#氣閥15和9#氣閥17進氣口抽氣,超順硅珠細胞裂解液進入儲液
    池5,開動氣動泵閥在10#氣閥18和11#氣閥19進氣口抽氣,樣品清洗液,樣品洗脫液進入儲
    樣池6,完成血液樣本DNA純化過程,最后氣動微閥在進氣口9#氣閥17和11#氣閥19進氣口進
    氣,進氣口10#氣閥18和12#氣閥20進氣口抽氣,收集含有純化核酸的洗脫液到DNA收集池7。
    展開

專利技術附圖

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