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蛋白酶檢測用電化學(xué)傳感器及制備方法及檢測方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-01-28
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201711421008.5 
  • 技術(shù)(專利)名稱 蛋白酶檢測用電化學(xué)傳感器及制備方法及檢測方法 
  • 項(xiàng)目單位 安陽師范學(xué)院
  • 發(fā)明人 夏寧,劉林,趙豐,鄧德華 
  • 行業(yè)類別
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 楊舒童
  • 發(fā)布時(shí)間 2022-01-28  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    蛋白酶檢測用電化學(xué)傳感器,所述的電化學(xué)傳感器采用在玻碳電極表面修飾一層芘丁標(biāo)記的多肽?石墨烯復(fù)合物,所述的多肽的序列特征是:所述的多肽能夠被對應(yīng)的蛋白酶切割,切割位點(diǎn)往碳端方向的第三個(gè)氨基酸是組氨酸,第四個(gè)氨基酸是側(cè)鏈上修飾了芘丁基團(tuán)的賴氨酸。蛋白酶檢測的檢測方法,包括以下步驟:1:電化學(xué)傳感器的制備,包括以下子步驟:1.1:多肽?石墨烯復(fù)合物的制備:1.2:電化學(xué)傳感器的制備:2:蛋白酶的檢測。本方法屬于“信號增強(qiáng)”的高通量電化學(xué)傳感方法,具有背景電流低、抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
    展開
  • 02

    說明書

    1.蛋白酶檢測用電化學(xué)傳感器的制備方法,其特征在于包括以下步驟:A:多肽-石墨烯復(fù)合物的制備:將石墨烯納米片與芘丁標(biāo)記的多肽溶液超聲混合30分鐘,所述的多肽的序列特征是:所述的多肽能夠被對應(yīng)的蛋白酶切割,切割位點(diǎn)往碳端方向的第三個(gè)氨基酸是組氨酸,第四個(gè)氨基酸是側(cè)鏈上修飾了芘丁基團(tuán)的賴氨酸,離心棄除上層剩余的多肽,然后用磷酸緩沖溶液將所得到的多肽-石墨烯復(fù)合物離心洗滌3次,于4 ℃下保存?zhèn)溆?;B:電化學(xué)傳感器的制備:將步驟A中制備得到的芘丁標(biāo)記的多肽-石墨烯復(fù)合物多用磷酸緩沖溶液震蕩分散,取出5微升混合液滴加到直徑為3 mm的玻碳電極表面,自然晾干,得到電化學(xué)傳感器。2.蛋白酶檢測的檢測方法,其特征在于包括以下步驟:1:電化學(xué)傳感器的制備,包括以下子步驟:1.1:多肽-石墨烯復(fù)合物的制備:將石墨烯納米片與芘丁標(biāo)記的多肽溶液超聲混合30分鐘,所述的多肽的序列特征是:所述的多肽能夠被對應(yīng)的蛋白酶切割,切割位點(diǎn)往碳端方向的第三個(gè)氨基酸是組氨酸,第四個(gè)氨基酸是側(cè)鏈上修飾了芘丁基團(tuán)的賴氨酸,離心棄除上層剩余的多肽,然后用磷酸緩沖溶液將所得到的多肽-石墨烯復(fù)合物離心洗滌3次,于4℃下保存?zhèn)溆茫?.2:電化學(xué)傳感器的制備:將步驟A中制備得到的芘丁標(biāo)記的多肽-石墨烯復(fù)合物多用磷酸緩沖溶液震蕩分散,取出5微升混合液滴加到直徑為3 mm的玻碳電極表面,自然晾干,得到電化學(xué)傳感器;2:蛋白酶的檢測:將步驟1得到的電極浸泡于待檢測的蛋白酶溶液中,取出后用二次水沖洗干凈,再在包含50μM 硫酸銅的磷酸緩沖溶液中進(jìn)行循環(huán)伏安掃描測試,所述的磷酸緩沖溶液濃度為0.2M,pH值為 7.4。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蛋白酶檢測的檢測方法,其特征在于:循環(huán)伏安掃描采用三電極體系,步驟1得到的電化學(xué)傳感器為工作電極,飽和的Ag/AgCl電極為參比電極,Pt電極為輔助電極。
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