本發明公開一種用于鴨坦布蘇病毒抗體的固相競爭ELISA檢測試劑盒。本發明的鴨坦布蘇病毒血清學檢測試劑盒包含有包被鴨坦布蘇病毒滅活抗原的ELISA板，兔抗鴨坦布蘇病毒的陽性血清、鴨抗鴨坦布蘇病毒的陽性對照血清和鴨陰性對照血清。采用本發明的試劑盒進行檢測，可不分種屬的檢測鴨坦布蘇病毒易感動物血清，不僅可以高通量的檢測田間血清樣品，還可根據需要檢測樣品的抗體效價。同時，所提供的固相競爭ELISA試劑盒操作簡單，易于掌握；不需高端儀器設備，易于推廣；成本低，適于田間血清樣品檢測及實驗室研究應用。

1.一種鴨坦布蘇病毒抗體固相競爭ELISA檢測試劑盒制備方法，待Vero細胞生長密度達80%左右時，取-80℃保存的10^5?TCID₅₀的鴨坦布蘇病毒，冰上融化后用OPTI-MEM做5倍稀釋，取2.5mL感染75cm²細胞瓶中細胞，37℃孵育1小時，期間每15分鐘輕輕晃動2-3次，之后棄掉病毒感染液，再加入10mL?OPTI-MEM，最后置于37℃、5%?CO_2?的恒溫培養箱中培養，待細胞發生病變，病變細胞漂浮后將細胞瓶置于-80℃，反復凍融3次，之后于4℃、8000rpm的條件下離心30分鐘去除細胞碎片，再將上清于4℃、35000rpm的條件下離心3小時，棄上清，用適量的PBS溶液懸浮沉淀，收集的病毒用2‰甲醛37℃過夜滅活，滅活后的鴨坦布蘇病毒用于包被ELISA板，其特征在于包被和封閉條件為：抗原濃度為10ng/μL，50μL/孔，4℃過夜；甩干ELISA板，再用PBST?100μL/孔，洗4遍；用2%BSA?100μL/孔封閉，37℃，1小時。2.權利要求1所述方法制備的鴨坦布蘇病毒抗體固相競爭ELISA檢測試劑盒。3.根據權利要求2所述的鴨坦布蘇病毒抗體固相競爭ELISA檢測試劑盒，其特征在于試劑盒內還含有兔抗鴨坦布蘇病毒的陽性血清、鴨抗鴨坦布蘇病毒的陽性對照血清和鴨陰性對照血清。4.根據權利要求2或3所述的鴨坦布蘇病毒抗體固相競爭ELISA檢測試劑盒，其特征在于試劑盒內還有PBST溶液、TMB?A液、TMB?B液和終止液。