1.一種同時分析檢測動物組織中殘留獸藥組分的方法,所述殘
留獸藥組分為吡哌酸、麻保沙星、培氟沙星、氧氟沙星、依諾沙星、
諾氟沙星、環丙沙星、恩諾沙星、單諾沙星、洛美沙星、奧比沙星、
雙氟沙星、沙拉沙星、斯帕沙星、西諾沙星、惡喹酸、萘啶酸、氟甲
喹、磺胺、乙?;前?、磺胺嘧啶、磺胺二甲異嘧啶、磺胺噻唑、磺胺
吡啶、磺胺甲嘧啶、三甲氧芐胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪、磺胺對甲氧嘧
啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲噻唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺
胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲異惡唑、磺胺苯甲酰、磺胺苯吡唑、磺胺氯
噠嗪、乙胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺喹惡啉、氨苯砜、苯乙醇胺A、金
剛烷胺、金剛乙胺、阿莫西林或乙氧基喹啉;
其特征在于所述方法包括以下步驟:
(1)制備樣品溶液:每5g搗碎后的動物組織樣品按照以下方法
處理得到樣品溶液:
稱取5g搗碎后的動物組織樣品于離心管中,加入6mL?2.0
mmol/L乙酸銨水溶液,9mL體積比4:1的乙腈+乙醇混合液,高速
充分勻漿,混勻后超聲提取5min,離心,取上清液A,剩余殘渣加
入15mL體積比4:1的乙腈+乙醇混合液,超聲提取5min,離心、
取上清液B與上清液A合并,得提取液,加入15mL正己烷,混勻
后離心,得下層清液體,取其中7.5mL,經0.22μm濾膜過濾到帶刻
度的離心管中,40℃水浴下氮氣吹至1~1.2mL,加入200μL?DMSO
后,用2.0mmol/L乙酸銨水溶液定容至1.5mL刻度線,得樣品溶液;
(2)將步驟(1)所得的樣品溶液經超高效液相色譜-串聯質譜
聯用儀檢測,得樣品溶液的超高效液相色譜圖,色譜條件為:以碳十
八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,粒徑≤5μm;梯度洗脫:流動相A為
含體積分數0.1%的甲酸的甲醇溶液,流動相B為含體積分數0.1%的甲
酸的水溶液;色譜柱溫度為40℃;進樣量10μL,流速為0.3mL/min;
質譜條件為:ESI正負離子同時掃描模式,毛細管電壓分別為3.5kV
和3.0kV,源溫145℃,去溶劑氣溫度:450℃;去溶劑氣氮氣流
速:900L/h;錐孔氣氮氣流速:50L/h;碰撞氣體:氬氣3.3×10
-3mba;
多反應監測模式檢測;
(3)繪制標準曲線:取吡哌酸、麻保沙星、培氟沙星、氧氟沙星、
依諾沙星、諾氟沙星、環丙沙星、恩諾沙星、單諾沙星、洛美沙星、
奧比沙星、雙氟沙星、沙拉沙星、斯帕沙星、西諾沙星、惡喹酸、萘
啶酸、氟甲喹、磺胺、乙酰磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲異嘧啶、磺胺
噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲嘧啶、三甲氧芐胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪、磺
胺對甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲噻唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺
甲惡唑、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲異惡唑、磺胺苯甲酰、磺胺苯吡
唑、磺胺氯噠嗪、乙胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺喹惡啉、氨苯砜、苯乙
醇胺A、金剛烷胺、金剛乙胺、阿莫西林、乙氧基喹啉的標準品,配
制成不同濃度的混合的標準工作液,按照步驟(2)相同條件進行測
試,得標準工作液的超高效液相色譜圖,分別對各個標準品,按照其
濃度和峰面積,繪制標準曲線,分別得到上述46種標準品的標準曲
線;
(4)根據步驟(2)中樣品溶液的超高效液相色譜圖中各待測成
分的峰面積及其對應的標準品的標準曲線,計算出樣品溶液中各待測
成分的濃度,以公式(1)計算得到動物組織樣品中各待測成分的含
量:
X=(1.5mL×C/7.5mL×30mL)/M=6mL×C/M×100%……(1)
X——動物組織樣品中待測成分的含量,單位μg/kg
C——根據標準曲線得到樣品溶液中待測成分的濃度,單位ng/mL
M——動物組織樣品的質量,單位g;
所述步驟(2)中,所述梯度洗脫的程序如下表所示:
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(1)中,所
述高速充分勻漿通常是以20000r/min的轉速高速勻漿1~2min。