1.一種固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性PCR檢測試劑盒,其特征在于包括有特異性
PCR檢測引物對1,所述引物對1的核苷酸序列分別為:SEQ ID No.1和SEQ ID No.2。
2.一種固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性的PCR定性檢測方法,其特征在于使用權利
要求1所述的引物對1。
3.權利要求2所述的方法,操作步驟如下:
(1)提取待檢測樣品的DNA;
(2)以提取的DNA為模板,用所述引物對1建立PCR反應體系,并進行PCR擴增;
(3)根據是否能擴增出核苷酸序列為SEQ ID No.3的DNA片段的條帶,鑒定被檢測的樣
品是否為固氮施氏假單胞菌A1501菌株:如果擴增出該條帶,則確定是固氮施氏假單胞菌
A1501;如果不能擴增出,則確定不是。
4.權利要求3所述的方法,所述PCR反應體系為:總體積20.0μL,其中,10×PCR緩沖液2μ
L,dNTPs混合溶液2μL,10μmol/L SEQ ID No.1所示的引物0.5μL,10μmol/L SEQ ID No.2所
示的引物0.5μL,5U/μL Go Taq酶0.2μL,25mg/L DNA模板2.0μL,余量為雙蒸水。
5.權利要求3所述的方法,PCR擴增條件為:96℃,5min;96℃,30s,56℃,30s,72℃,30s,
35個循環;72℃,5min。
6.權利要求3所述的方法,所述提取待檢測樣品的DNA的方法,選自CTAB法、溶菌酶法或
SDS裂解法。
7.SEQ ID No.3所示序列的核苷酸在檢測固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性中的應
用。
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