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固氮施氏假單胞菌A1501菌株的特異性檢測方法及試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-21
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610154440.1 
  • 技術(專利)名稱 固氮施氏假單胞菌A1501菌株的特異性檢測方法及試劑盒 
  • 項目單位 中國農業科學院生物技術研究所
  • 發明人 周正富,張維,燕永亮,戰崳華,柯秀彬,林敏 
  • 行業類別 醫療器械-監護設備
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 沈柏軒
  • 發布時間 2022-01-21  
  • 01

    項目簡介

    本發明設計了用于固氮施氏假單胞菌A1501的一對PCR檢測引物。本發明還提供了包含所述引物的試劑盒。經實驗證明,應用本發明的檢測引物對轉固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性的PCR定性檢測,特異性顯著。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性PCR檢測試劑盒,其特征在于包括有特異性
    PCR檢測引物對1,所述引物對1的核苷酸序列分別為:SEQ ID No.1和SEQ ID No.2。
    2.一種固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性的PCR定性檢測方法,其特征在于使用權利
    要求1所述的引物對1。
    3.權利要求2所述的方法,操作步驟如下:
    (1)提取待檢測樣品的DNA;
    (2)以提取的DNA為模板,用所述引物對1建立PCR反應體系,并進行PCR擴增;
    (3)根據是否能擴增出核苷酸序列為SEQ ID No.3的DNA片段的條帶,鑒定被檢測的樣
    品是否為固氮施氏假單胞菌A1501菌株:如果擴增出該條帶,則確定是固氮施氏假單胞菌
    A1501;如果不能擴增出,則確定不是。
    4.權利要求3所述的方法,所述PCR反應體系為:總體積20.0μL,其中,10×PCR緩沖液2μ
    L,dNTPs混合溶液2μL,10μmol/L SEQ ID No.1所示的引物0.5μL,10μmol/L SEQ ID No.2所
    示的引物0.5μL,5U/μL Go Taq酶0.2μL,25mg/L DNA模板2.0μL,余量為雙蒸水。
    5.權利要求3所述的方法,PCR擴增條件為:96℃,5min;96℃,30s,56℃,30s,72℃,30s,
    35個循環;72℃,5min。
    6.權利要求3所述的方法,所述提取待檢測樣品的DNA的方法,選自CTAB法、溶菌酶法或
    SDS裂解法。
    7.SEQ ID No.3所示序列的核苷酸在檢測固氮施氏假單胞菌A1501菌株特異性中的應
    用。
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專利技術附圖

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