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自閉癥生物標志物及其檢測試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-05
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710341266.6 
  • 技術(專利)名稱 自閉癥生物標志物及其檢測試劑盒 
  • 項目單位 深圳市英馬諾生物科技有限公司
  • 發明人 王明幫,王艷,周家秀,楊爭,周少明,何福生 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊文彬
  • 發布時間 2022-01-05  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了自閉癥生物標志物,即腸道中的IgA水平,由此自閉癥的診斷將不依靠主觀經驗判斷,不僅可以對自閉癥的發病提供有效預警,而且可對其進行確診,極大提高了診斷準確率;本發明還提供了用于診斷自閉癥的試劑盒,包括適用于檢測所述的自閉癥生物標志物的試劑,還包括分析所述自閉癥生物標志物在體內是否異常的工具;本發明進一步提供了篩選易患自閉癥的生物樣品的系統,通過此篩選系統,可篩選易患自閉癥的生物樣品。
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  • 02

    說明書

    1.檢測腸道中的IgA水平的試劑組合在制備用于診斷自閉癥的試劑盒中的用途。2.根據權利要求1的用途,其特征在于:所述檢測腸道中的IgA水平的試劑組合包括ELISA檢測試劑;所述ELISA檢測試劑包括含1μg/ml羊抗人IgA,IgG,IgM(H+L)抗體的磷酸鹽緩沖液;所述ELISA檢測試劑還包括HRP標記的羊抗人IgA的溶液,其是采用品牌為Jackson且貨號為109-036-011的HRP標記的羊抗人IgA以體積比1:10000稀釋于含2.5%脫脂牛奶的PBS中獲得;所述ELISA檢測試劑還包括含0.2%吐溫-20的磷酸鹽緩沖液;所述ELISA檢測試劑還包括含2.5%脫脂牛奶的磷酸鹽緩沖液;所述ELISA檢測試劑還包括磷酸緩沖鹽溶液;所述ELISA檢測試劑還包括TMB顯色液;所述ELISA檢測試劑還包括終止液;所述終止液為濃度為2M的H2SO4溶液。3.根據權利要求1的用途,其特征在于:所述用于診斷自閉癥的試劑盒的使用包括以下步驟:獲取來自受測個體腸道的第一生物樣品和來自正常個體腸道的第二生物樣品;將第一生物樣品和第二生物樣品進行勻漿處理從而提取上清;將上清分別進行等同稀釋后進行ELISA檢測;根據ELISA檢測的結果對第一生物樣品和第二生物樣品所含的腸道中的IgA水平進行差異顯著性分析;所述第一生物樣品和第二生物樣品均為腸道固體排泄物;將第一生物樣品和第二生物樣品進行勻漿處理從而提取上清包括如下步驟:獲取第一生物樣品和第二生物樣品的糞便各0.3克左右,均用兩倍體積的磷酸緩沖鹽溶液進行勻漿處理,然后20000g離心10分鐘,取上清作為生物樣本提取液;所述ELISA檢測包括如下步驟:步驟一:在ELISA反應板中加入含1μg/ml羊抗人IgA,IgG,IgM(H+L)抗體的PBS,4℃密封孵育16小時;拍干反應板,用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,再用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,得到包被好的ELISA板;步驟二:在包被好的ELISA板孔中加入75μl含2.5%脫脂牛奶的PBS和25μl生物樣本提取液于反應板孔中,于37℃孵育1小時;步驟三:用含0.2%吐溫20的PBS洗滌ELISA板孔,拍干反應板,重復四次,洗板后在各反應板孔加入100μlHRP標記的羊抗人IgA的溶液于37℃孵育1小時;步驟四:用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,重復五次,洗板后在各反應板孔均加入TMB顯色液100μl顯色,置于37℃保溫15min,然后每孔加入50μl終止液終止反應;步驟五:分別于終止后,將各反應板置酶標儀中,讀取OD450值。4.一種用于篩選易患自閉癥患者的生物樣品的系統,其特征在于,包括:勻漿處理裝置,所述勻漿處理裝置用于將待測樣品和對照樣品進行勻漿處理從而提取上清;ELISA檢測裝置,所述ELISA檢測裝置與所述勻漿處理裝置相連,用于檢測待測樣品和對照樣品各自上清經ELISA檢測試劑處理后的酶標值;以及分析裝置,所述分析裝置與所述ELISA檢測裝置相連,基于所述酶標值對所述待測樣品和所述對照樣品所含的IgA水平進行差異顯著性分析,根據分析結果判斷所述待測樣品是否來自易患自閉癥患者,其中,所述待測樣品腸道中的IgA總含量顯著高于所述對照樣品是所述待測樣品來自易患自閉癥患者的指示;所述待測樣品和對照樣品均為腸道固體排泄物;將待測樣品和對照樣品進行勻漿處理包括如下步驟:稱取所述待測樣品和對照樣品各0.3克左右,均用兩倍體積的磷酸緩沖鹽溶液進行勻漿處理,然后20000g離心10分鐘,取上清作為生物樣本提取液;所述檢測待測樣品和對照樣品各自上清經ELISA檢測試劑處理后的酶標值包括如下步驟:步驟一:在ELISA反應板中加入含1μg/ml羊抗人IgA,IgG,IgM(H+L)抗體的PBS,4℃密封孵育16小時;拍干反應板,用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,再用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,得到包被好的ELISA板;步驟二:在包被好的ELISA板孔中加入75μl含2.5%脫脂牛奶的PBS和25μl生物樣本提取液于反應板孔中,于37℃孵育1小時;步驟三:用含0.2%吐溫20的PBS洗滌ELISA板孔,拍干反應板,重復四次,洗板后在各反應板孔加入100μlHRP標記的羊抗人IgA的溶液于37℃孵育1小時;步驟四:用含0.2%吐溫-20的PBS洗滌板孔,拍干反應板,重復五次,洗板后在各反應板孔均加入TMB顯色液100μl顯色,置于37℃保溫15min,然后每孔加入50μl終止液終止反應;步驟五:分別于終止后,將各反應板置酶標儀中,讀取OD450值。
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