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一種非診斷目的檢測ApoA5生物學(xué)活性的方法及試劑盒

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-25
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201510002726.3 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種非診斷目的檢測ApoA5生物學(xué)活性的方法及試劑盒 
  • 項目單位 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院
  • 發(fā)明人 趙水平,羅俊,鄭小燕,聶賽,趙旺 
  • 行業(yè)類別
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 蔣睿燕
  • 發(fā)布時間 2021-12-25  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明涉及蛋白活性檢測領(lǐng)域,特別涉及一種非診斷目的檢測ApoA5生物學(xué)活性的方法及試劑盒。該方法包括:將HL?1心肌細胞與ApoA5孵育,經(jīng)固定、打孔后,與ApoA5第一抗體孵育,再與熒光標(biāo)記的ApoA5第二抗體孵育,觀察所述熒光標(biāo)記在HL?1心肌細胞中的位置,獲得ApoA5生物學(xué)活性。本發(fā)明提供的檢測方法通過觀察HL?1心肌細胞對ApoA5的攝取情況可準確檢測ApoA5的生物學(xué)活性。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種非診斷目的檢測ApoA5生物學(xué)活性的方法,其特征在于,包括
    如下步驟:
    將HL-1心肌細胞與ApoA5孵育,經(jīng)固定、打孔后,與ApoA5第一抗體
    孵育,再與熒光標(biāo)記的ApoA5第二抗體孵育,觀察所述熒光標(biāo)記在HL-1心
    肌細胞中的位置,獲得ApoA5生物學(xué)活性。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述與ApoA5孵育的時
    間為12~24小時,溫度為37℃。
    3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述固定采用的試劑為多
    聚甲酸。
    4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述打孔采用的試劑為
    TritonX-100。
    5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述與ApoA5第一抗體
    孵育的時間為8~24小時,溫度為4℃。
    6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述與熒光標(biāo)記的ApoA5
    第二抗體孵育具體為:在15~30℃、避光條件下與熒光標(biāo)記的ApoA5第二抗
    體孵育30~40分鐘。
    7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述ApoA5的濃度為
    600~3000ng/mL。
    8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述觀察為采用激光共聚
    焦技術(shù)觀察。
    9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述熒光標(biāo)記為CY3標(biāo)記。
    10.一種檢測ApoA5生物學(xué)活性的試劑盒,其特征在于,包括HL-1心
    肌細胞、ApoA5、固定劑、打孔劑、ApoA5第一抗體、熒光標(biāo)記的ApoA5第
    二抗體。
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專利技術(shù)附圖

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