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一種南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-16
  • 技術(shù)成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201410819419.X 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法 
  • 項目單位 廣西大學(xué)
  • 發(fā)明人 王繼華,張木清,徐世強(qiáng) 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術(shù)成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 王軍艷
  • 發(fā)布時間 2021-12-16  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明根據(jù)南美叉柱花的生長特性在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上配制出適合南美叉柱花組織培養(yǎng)的用于不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根的培養(yǎng)基。使用本發(fā)明所述的用于不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根的培養(yǎng)基能有效提高繁殖系數(shù),降低生產(chǎn)成本;生產(chǎn)周期短,種植效益大大提高;能夠有效解決夏季南美叉柱花嚴(yán)重供應(yīng)不足的問題,也為種植者提供良好的經(jīng)濟(jì)效益。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,包括以下步驟:(1)外植體選取與消毒,(2)改良MS培養(yǎng)基的制備,(3)不定芽誘導(dǎo),(4)繼代增殖,(5)無菌生根以及(6)煉苗與移栽,其特征在于,具體步驟如下:(1)外植體選取與消毒:①選取生長健壯的南美叉柱花幼嫩的枝條作為外植體,②用中性洗滌劑洗滌枝條,以去除枝條表面的污垢,然后去除多余的葉片,用干凈紙巾吸干表面水分,③在超凈工作臺上,先用70%酒精浸泡10-30s,再用無菌水沖洗3-5次,每次3-5min,④立即轉(zhuǎn)入0.3%的升汞溶液中消毒8-12min,最后用無菌水洗滌3-5次,每次3-5min,得到消毒外植體;(2)改良MS培養(yǎng)基的制備:改良MS培養(yǎng)基的配方為:用Ca(NO32·4H2O代替原MS培養(yǎng)基中的CaCl2·2H2O并添加抗壞血酸,其他組分均無變化;其中Ca(NO32·4H2O的濃度為95~120mg/L,抗壞血酸的濃度為3~8mg/L;(3)不定芽誘導(dǎo):將步驟(1)得到的消毒外植體切割成0.4-0.5cm長的單芽或雙芽莖段,然后接種于用于不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基,進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)22天,得到南美叉柱花不定芽;誘導(dǎo)培養(yǎng)條件如下:溫度為26±3℃,濕度為80%,光照時間為15小時/天,光照強(qiáng)度為1000-12001x;所述用于不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基的配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基上添加6-BA、KT以及NAA;在不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.05-5mg/L,KT的濃度為0.1-1mg/L,NAA的濃度為0.05-0.5mg/L;(4)繼代增殖:將步驟(3)得到的南美叉柱花不定芽接入用于繼代增殖的培養(yǎng)基,進(jìn)行繼代培養(yǎng)20-25天,得到南美叉柱花無菌苗;繼代增殖培養(yǎng)條件如下:溫度為26±3℃,濕度為65%,光照時間為15小時/天,光照強(qiáng)度為800-12001x;所述用于繼代增殖的培養(yǎng)基的配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA、KT以及NAA,在繼代增殖培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.5-2mg/L,KT的濃度為0.1-2mg/L,NAA的濃度為0.05-5mg/L;(5)無菌生根:將步驟(4)獲得的南美叉柱花無菌苗進(jìn)行切繁,并保持每株均有一個不定芽,接入用于無菌生根的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)20天,得到南美叉柱花幼苗;生根培養(yǎng)條件如下:培養(yǎng)溫度為26±3℃,濕度為65%,光照時間為15小時/天,光照強(qiáng)度為1000-12001x;所述用于無菌生根的培養(yǎng)基的配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加IBA和NAA,在生根培養(yǎng)基中IBA的濃度為0.1-1mg/L,NAA的濃度為0.5-5mg/L;(6)煉苗與移栽:步驟(5)中南美叉柱花幼苗生長至根長0.5~2cm、苗高3-4cm后,將培養(yǎng)瓶瓶蓋打開,室內(nèi)煉苗培養(yǎng)5-7天,然后洗凈根部培養(yǎng)基,移入采用64孔的穴盤,消毒后的水池,塑料大棚,遮光率75-80%的遮陽網(wǎng);經(jīng)室內(nèi)煉苗5~7天后用消毒后的巖棉包裹好組培苗根部,放入直徑為5~10cm的鏤空塑料杯中,置于塑料大棚,移栽5-7天后即可上市。2.如權(quán)利要求1所述的南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于,在改良MS培養(yǎng)基中Ca(NO32·4H2O的濃度為112mg/L,抗壞血酸的濃度為5mg/L。3.如權(quán)利要求1所述的南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于,在所述用于不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基中6-BA的濃度為1mg/L,KT的濃度為0.5mg/L,NAA的濃度為0.2mg/L。4.如權(quán)利要求1所述的南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于,在所述用于繼代增殖的培養(yǎng)基中6-BA的濃度為1mg/L,KT的濃度為0.5mg/L,NAA的濃度為0.2mg/L。5.如權(quán)利要求1所述的南美叉柱花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于,在所述用于無菌生根的培養(yǎng)基中IBA的濃度為0.5mg/L,NAA的濃度為1mg/L。
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專利技術(shù)附圖

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