1.一種黃山欒樹的組培方法,其特征在于:包括如下步驟,
(1)黃山欒樹葉提取液的制備
將新鮮黃山欒樹葉切割成小塊后在蒸餾水中煮沸,冷卻、過濾后
配成質量濃度為10%的提取液;
(2)初代誘導培養
初代誘導培養基為3/4WPM+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.05~0.08
mg/L+2~3%提取液+白糖20g/L+瓊脂5~8g/L,pH5.8;其中,2~3%
提取液指的是質量濃度,由步驟(1)中質量濃度為10%的提取液稀
釋而成;
從健壯黃山欒樹植株上獲取黃山欒樹莖段外植體,外植體經常規
消毒后接種于初代誘導培養基上;培養溫度為25±2℃,光照強度為
1500~2000Lx,光暗周期比為12h:12h;
(3)繼代增殖培養
繼代增殖培養基為:3/4WPM+6-BA0.3~0.8mg/L+NAA0.03~0.05
mg/L+2~3%提取液+白糖20g/L+瓊脂5~8g/L,pH5.8;其中,2~3%
提取液指的是質量濃度,由步驟(1)中質量濃度為10%的提取液稀
釋而成;
將初代誘導培養得到的黃山欒樹無菌苗的莖段或莖尖無菌接種
于繼代增殖培養基上進行培養,培養溫度為25±2℃,光照強度為
1500~2000Lx,光暗周期比為12h:12h;
(4)組培苗生根
生根培養基為:2/5WPM+IBA0.1~0.3mg/L+1~2%提取液+白糖20
g/L+瓊脂5~8g/L,pH5.8;其中,1~2%提取液指的是質量濃度,由
步驟(1)中質量濃度為10%的提取液稀釋而成;
將增殖培養獲得的黃山欒樹無菌叢生苗切成單株接種于生根培
養基上,培養溫度為25±2℃,光照強度為1500~2000Lx,光暗周期
比為12h:12h;
(5)試管苗的馴化和移栽
將黃山欒樹生根試管苗從培養室移至塑料大棚放置5~7d后,去
瓶蓋煉苗3~5d,然后從瓶內取出黃山欒樹幼苗,用水輕輕洗凈培養
基,將待栽的黃山欒樹幼苗根部用0.1%多菌靈處理10s后,將幼苗
移栽入穴盤中的栽培基質內,覆膜保濕5~7d,其間每天通風透氣
10~15min兩次,視光照強度適當加蓋遮陽網,一周后完全揭除塑料
薄膜小拱棚,噴施1000倍液的甲基托布津,此后進行正常的栽培管
理。
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