1.一種花生體胚誘導及植株再生的方法,其特征在于包括如下步驟,
(1)制備體胚誘導培養基:選取MSB5為基本培養基,在所述基本培養基
中添加2,4-D制成體胚誘導培養基,2,4-D的添加量為每升所述基本培養基中
添加5~10mg,所述MSB5為MS無機鹽+B5有機成分所組成的培養基;
(2)選擇外植體材料:將花生種子去子葉后的種胚表面消毒,取胚小葉
為外植體材料;
(3)按以下步驟進行體胚誘導及植株再生:
a將花生種子去子葉后的種胚進行表面消毒,然后用無菌水漂洗后,置于
裝有無菌水的廣口瓶中浸泡12~16h;
b取出經表面消毒浸泡好的種胚,置于無菌培養皿中分離種胚的胚小葉,
接種到所述誘導培養基中進行誘導培養,25~30d后形成體胚;
c將形成有體胚的外植體轉移至體胚萌發培養基上進行萌發培養,每隔
25~30d繼代一次,繼代兩次后得到再生苗;所述體胚萌發培養基是由選取MSB5
為基本培養基,在所述基本培養基中添加BAP形成,BAP的添加量為每升所述
基本培養基中添加4mg;
d當再生苗生長至2~3cm時,從基部切下,轉移至生根培養基中誘導生根,
獲得完整植株;所述生根培養基是由選取1/2MSB5為基本培養基,在所述1/2MSB5
基本培養基中添加NAA形成,NAA的添加量為每升所述基本培養基中添加0.2~
0.5mg。
2.根據權利要求1所述的花生體胚誘導及植株再生的方法,其特征在于,
所述培養基均在培養室溫度為24~26℃、光照強度為2500~3500Lx、光照時間
為13h/d的培養條件下培養。
3.根據權利要求1所述的花生體胚誘導及植株再生的方法,其特征在于,
所述花生種子去子葉后的種胚進行表面消毒是采用75%的酒精浸泡15~25s,再
用0.1%的升汞浸泡。
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