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一種提高蛹蟲草菌液體發(fā)酵蟲草素產(chǎn)量的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-25
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201710972495.8 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種提高蛹蟲草菌液體發(fā)酵蟲草素產(chǎn)量的方法 
  • 項(xiàng)目單位 甘肅省科學(xué)院生物研究所
  • 發(fā)明人 秦鵬,王龍,路等學(xué),郭瑞,趙玉卉,韓融冰,丁品 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-動(dòng)物藥材養(yǎng)殖
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 秦鈺丹
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-12-25  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,步驟為:將菌株轉(zhuǎn)接于無菌PDA斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、活化,得斜面母種;斜面母種轉(zhuǎn)接至平皿培養(yǎng)基培養(yǎng),得平板母種;平板母種接種至種子培養(yǎng)基,搖床培養(yǎng),得種子液;種子液接種至優(yōu)化培養(yǎng)基并用無菌聚丙烯袋封住三角瓶口,搖床培養(yǎng),得待補(bǔ)料發(fā)酵液;依據(jù)腺嘌呤補(bǔ)料公式配制腺嘌呤補(bǔ)料溶液,向待補(bǔ)料發(fā)酵液添加100mL腺嘌呤補(bǔ)料溶液,使得發(fā)酵液腺嘌呤達(dá)到其優(yōu)化質(zhì)量濃度,得已補(bǔ)料發(fā)酵液;將已補(bǔ)料發(fā)酵液于搖床培養(yǎng)后,繼續(xù)靜置培養(yǎng),得含菌絲體的發(fā)酵液;將含菌絲體的發(fā)酵液中的菌絲體濾除,得蟲草素發(fā)酵濾液。其工藝簡單、無污染、蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量高達(dá)956.020μg/mL。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:用中國微生物菌種保藏中心的蛹蟲草菌(Cordyceps militaris)CGMCC3.4655;按照下述步驟進(jìn)行:(1)將菌株轉(zhuǎn)接于無菌PDA斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、活化,制得斜面母種;(2)將斜面母種轉(zhuǎn)接至平皿培養(yǎng)基培養(yǎng),制得平板母種;(3)將平板母種接種至種子培養(yǎng)基,搖床培養(yǎng),制得種子液;(4)將種子液接種至優(yōu)化培養(yǎng)基并用無菌聚丙烯袋封住三角瓶口,于黑暗、25℃、160r/min搖床培養(yǎng),制得待補(bǔ)料發(fā)酵液;優(yōu)化培養(yǎng)基中腺嘌呤和甘氨酸的質(zhì)量濃度分別為2g/L和14g/L并且均為優(yōu)化質(zhì)量濃度;向待補(bǔ)料發(fā)酵液添加腺嘌呤補(bǔ)料溶液的時(shí)間點(diǎn)為搖床培養(yǎng)第12d;(5)依據(jù)腺嘌呤補(bǔ)料公式配制腺嘌呤補(bǔ)料溶液,向待補(bǔ)料發(fā)酵液添加100mL腺嘌呤補(bǔ)料溶液,使得發(fā)酵液腺嘌呤達(dá)到其優(yōu)化質(zhì)量濃度,制得已補(bǔ)料發(fā)酵液;其中,腺嘌呤補(bǔ)料公式為ρ=(Vcc+V00)/(Vc+ V0),該腺嘌呤補(bǔ)料公式中,ρ為腺嘌呤的優(yōu)化質(zhì)量濃度2 g/L,ρ0為腺嘌呤補(bǔ)料溶液質(zhì)量濃度,V0為每個(gè)待補(bǔ)料發(fā)酵液中添加腺嘌呤補(bǔ)料溶液的體積100mL,ρc和Vc分別為第12d待補(bǔ)料發(fā)酵液腺嘌呤剩余量和發(fā)酵液體積;(6)將已補(bǔ)料發(fā)酵液于黑暗、25℃、160 r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)6d后,繼續(xù)在黑暗、25℃條件下靜置培養(yǎng)6d,靜置培養(yǎng)結(jié)束后制得含菌絲體的發(fā)酵液;(7)將含菌絲體的發(fā)酵液中的菌絲體濾除,收集濾液,制得蟲草素發(fā)酵濾液。2.如權(quán)利要求1所述的一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:步驟(2)所述的平皿培養(yǎng)基,其組方為:由蛋白胨10g、牛肉粉3g、氯化鈉5g與瓊脂15g組成的營養(yǎng)瓊脂33g與純凈水1000mL混勻, pH7.3±0.1;方法為:從斜面母種取3mm大小菌塊,接種至平皿培養(yǎng)基,于黑暗、20℃培養(yǎng)9d,制得平板母種。3.如權(quán)利要求1所述的一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:步驟(3)所述的種子培養(yǎng)基,其組方為:葡萄糖30g、蛋白胨8g、酵母粉8g、KH2PO4 1g與水1000mL混勻,pH自然;方法為:無菌條件下用打孔器取平板母種同一半徑上3 mm大小的6個(gè)菌塊接種至種子培養(yǎng)基裝載量為300mL/500mL的三角瓶中,于25℃、黑暗、120 r/min 搖床培養(yǎng)3d制成種子液。4.如權(quán)利要求1、2或3所述的一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:步驟(4)所述的優(yōu)化培養(yǎng)基,其組方為:葡萄糖35 g、蛋白胨17 g、腺嘌呤2 g、甘氨酸14g、KH2PO4 1 g、MgSO4·7H2O 1 g與純凈水1000mL混勻, pH自然;方法為:無菌條件下將10mL的種子液接種至裝有200mL無菌優(yōu)化培養(yǎng)基、體積為500mL的三角瓶中,用無菌聚丙烯袋封住三角瓶瓶口。5.如權(quán)利要求4所述的一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:步驟(5)所述的已補(bǔ)料發(fā)酵液制作中,腺嘌呤補(bǔ)料參數(shù)為:腺嘌呤補(bǔ)料溶液的質(zhì)量濃度按照腺嘌呤補(bǔ)料公式計(jì)算,每個(gè)待補(bǔ)料發(fā)酵液添加腺嘌呤補(bǔ)料溶液的體積為100mL;方法為:將步驟(4)裝有待補(bǔ)料發(fā)酵液的三角瓶從搖床取出并置于超凈工作臺(tái),無菌條件下,取下三角瓶瓶口的聚丙烯袋和瓶塞后,將裝載量100mL/150mL的無菌腺嘌呤溶液倒入待補(bǔ)料發(fā)酵液,制成已補(bǔ)料發(fā)酵液。6.如權(quán)利要求1所述的一種提高蛹蟲草菌發(fā)酵液蟲草素產(chǎn)量的方法,其特征在于:所述步驟(7)的蟲草素發(fā)酵濾液制作方法為:含菌絲體的發(fā)酵液經(jīng)0.22μm濾膜濾除菌絲體,收集濾液,即得蟲草素發(fā)酵濾液。
    展開

專利技術(shù)附圖

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    轉(zhuǎn)讓申請書

    轉(zhuǎn)讓協(xié)議

  • 手續(xù)合格通知書

    專利證書

    專利利登記簿副本

安全保障

  • 品類齊全

    海量資源庫,平臺(tái)整合幾十萬閑置資源。
  • 交易保障

    完善的資金保障體系確保買賣雙方資金安全。
  • 專人跟進(jìn)

    專業(yè)交易顧問全程服跟進(jìn),確保交易流暢。
  • 快速響應(yīng)

    專業(yè)在線/電話客服服務(wù),快速響應(yīng)貼心服務(wù)。
  • 售后無憂

    資質(zhì)過硬,國內(nèi)大知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)平臺(tái)。
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