本發明公開了一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法。該方法在懸浮細胞體胚誘導前先用不含2，4-D的M2液體培養基預培養7～10天，經篩網過濾篩選出大小及生長狀態較一致的細胞團，接種于體胚誘導培養基上。預培養可使體胚誘導率及其后的植株轉換率均提高1倍左右；經篩網過濾所得大小范圍為154μm～900μm的細胞團其體胚誘導效果最佳；大蕉和巴西蕉細胞的最佳接種量分別為0.4ml 20％SCV和1ml 20％SCV。此外在體胚誘導初期于香蕉現有技術體胚誘導培養基上添加ABA和抗壞血酸，在一定程度上防止了大蕉在體胚誘導期間培養物容易褐化的現象，并可有效提高大蕉和巴西蕉胚性懸浮細胞的體胚發生頻率。

1.一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于包括如下步驟：(1)胚性愈傷組織的誘導：分別以大蕉或巴西蕉1～12梳未成熟雄花序為外植體，接種于愈傷組織誘導培養基上誘導出胚性愈傷組織；(2)均一穩定的胚性細胞懸浮系的建立：挑取步驟(1)誘導出的大蕉黃色小顆粒狀胚性愈傷組織或巴西蕉淺黃色小顆粒狀胚性愈傷組織，分別轉入M2液體培養基中，置于90～110rpm搖床上懸浮培養3～4個月即得分散、均質的大蕉胚性細胞懸浮系或巴西蕉胚性細胞懸浮系；(3)體細胞胚胎的誘導：在體胚誘導前先將上述胚性懸浮細胞轉入不含2，4-D的M2液體培養基中預培養7～10天，隨后經篩網過濾篩選出大小及生長狀態一致的細胞團，從細胞團中吸取0.2～2ml?20％SCV即細胞接種量接種于含1mg·L^-1ABA和5mg·L^-1抗壞血酸的體胚誘導培養基中，置于28±1℃黑暗中進行體細胞胚胎的誘導；將誘導出的白色球形胚轉入去除ABA和抗壞血酸的體胚誘導培養基中繼續培養直至體胚發育成熟，得到成熟體胚；(4)體胚的萌發及其植株再生：將步驟(3)誘導出的成熟體胚轉入體胚萌發培養基中；置于28±1℃黑暗培養，待葉鞘抽出后，將其轉至MR生根壯苗培養基中繼續培養，進一步發育成健壯的香蕉小植株；所述愈傷組織誘導培養基的組成為MS基本培養基+4.5μmol·L^-1生物素+18μmol·L^-1?2，4-D+5.4μmol·L^-1?NAA+5.7μmol·L^-1?IAA+87mmol·L^-1蔗糖+7g·L^-1瓊脂，pH?5.8；所述M2液體培養基的組成為MS基本培養基+4.5μmol·L^-1?2，4-D+4.1μmol·L^-1生物素+680μmol·L^-1谷氨酰胺+100mg·L^-1麥芽提取物+130mmol·L^-1蔗糖，pH?5.3；所述體胚誘導培養基的組成為SH大量和微量元素及其鐵鹽+MS維生素+4.5μmol·L^-1生物素+680μmol·L^-1谷氨酰胺+2mmol·L^-1脯氨酸+100mg·L^-1麥芽提取物+1.1μmol·L^-1?NAA+0.5μmol·L^-1激動素+44μg·L^-1玉米素+29mmol·L^-1乳糖+130mmol·L^-1蔗糖+1mg.L^-1?ABA+5mg.L^-1抗壞血酸+2g·L^-1?Gelrite，pH?5.8；所述體胚萌發培養基的組成為MS大量元素和微量元素及其鐵鹽+Moreland?Wetmore維生素+0.2μmol·L^-1?6-BA+1.1μmol·L^-1?IAA+87mmol·L^-1蔗糖+2g·L^-1?gelrite，pH?5.8；所述MR生根壯苗培養基的組成為MS基本培養基+87mmol·L^-1蔗糖+0.1％活性炭+7g·L^-1瓊脂，pH?5.8。2.根據權利要求1所述的一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于：所述不含2，4-D的M2液體培養基的組成為：MS基本培養基+4.1μmol·L^-1生物素+680μmol·L^-1谷氨酰胺+100mg·L^-1麥芽提取物+130mmol·L^-1蔗糖，pH?5.3，高溫高壓滅菌。3.根據權利要求1所述的一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于：所述體胚誘導培養基中的ABA和抗壞血酸事先分別配置成10mg·ml^-1母液，過濾滅菌后添加到pH?5.8、經高溫高壓滅菌后溫度降至45℃的其余培養基成分中混勻，分裝于直徑9.5cm的培養皿中，20～25ml/皿。4.根據權利要求1所述的一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于：步驟(3)中所述20％SCV懸浮細胞是按下述方法制備得到：吸取5ml懸浮細胞于15ml刻度管中，靜置10分鐘后，棄上清，將所得的細胞沉淀體積用不添加凝固劑Gelrite的體胚誘導培養基稀釋至5倍體積。5.根據權利要求1所述的一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于：步驟(3)中所述經篩網過濾所得細胞團的大小范圍為154μm～900μm。6.根據權利要求1所述的一種建立大蕉和巴西蕉高效體細胞胚胎發生再生植株的方法，其特征在于：所述大蕉細胞的接種量為0.4ml?20％SCV；巴西蕉細胞的接種量為1ml?20％SCV。