1.一種花葉枸骨的組織培養方法,包括以下步驟:步驟1:消毒滅菌,選取當年生枝條嫩芽,自來水沖洗后,在超凈工作臺上以75%酒精浸泡30秒鐘,再轉入0.1%升汞溶液中滅菌8~10分鐘,倒去滅菌液,用預先準備好的無菌水沖洗4~5遍,瀝干水后,切取嫩芽組織,接種到誘芽培養基上;步驟2:接種培養a、初代培養,切取花葉枸骨嫩芽接種在WPM+ZT?2.0mg/L+NAA?0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5~7g/L,pH值5.5~5.8,培養基經1.1kg/cm2高壓消毒15~20分鐘,在溫度25~30℃,光照強度1500~2000lux,每日光照12小時的培養條件下培養;接種后一周,腋芽開始萌動,當30~40天伸長至2±0.2㎝時,切下進入下一階段的繼代培養;b、繼代培養,當初代培養的花葉枸骨腋芽長到2±0.2㎝時,切下接種在WPM+ZT?1.0mg/L+NAA?0.2mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5~7g/L,pH值5.5~5.8,在溫度25~30℃,光照強度1500~2000lux,每日光照12小時,無根的試管苗經30~40天培養,叢生苗達到3±0.2㎝時,切割以擴大繁殖;c、生根培養,當花葉枸骨無根苗長至2~3㎝時,轉移到生根培養基上培養;在溫度25~28℃,光照強度1500lux,每日光照10~12小時,經30~40天培養后,見白色短根形成,當根長至2~3㎝時,進行煉苗及移栽;所述煉苗及移栽的具體方法為:移栽前,花葉枸骨組培苗煉苗先在溫度20~30℃之間的溫室內擰松瓶蓋放置3~5天,然后進行溫床過渡移栽;過渡苗床建在普通單體的塑料大棚內,床寬1.2m左右,床四周砌高30㎝,床底整平,再用0.15%高錳酸鉀噴灑苗床表面及四周,24小時后移栽小苗;移栽時,將幼苗從瓶內取出,用清水將根部瓊脂清洗干凈;種入苗床后,選擇清潔水澆灌,移栽當天噴施0.3%的磷酸二氫鉀溶液,并噴施800~1000倍的甲基托布津或1000倍多菌靈藥液,以后每隔一周噴施一次,連續3~4次;步驟2中所述生根培養基的配方為:1/3WPM+0.2~0.3mg/L的NAA+0.3%活性炭。2.根據權利要求1所述花葉枸骨的組織培養方法,其特征在于:煉苗及移栽過程中,移栽初期要特別注意保持苗床和空氣濕度,需全封閉管理一周,再半封閉管理二周;第25天時逐步通風,并除去覆蓋物;在春秋季節移栽時,需遮蔭四周;冬季移栽時,遮蔭三周。
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