本發明提供了一種普瑞巴林人工抗原的制備方法，第一步為半抗原的制備及檢測：以普瑞巴林為原料，將其與三氟乙酸酐進行酰化反應，使普瑞巴林結構上的氨基得以保護，得到含有羧基的半抗原；第二步為人工抗原的制備與檢測：通過活潑酯法使之與牛血清蛋白(BSA)結合制備普瑞巴林的人工抗原即普瑞巴林?牛血清蛋白。所制備的普瑞巴林人工抗原可進行動物免疫，取得相應的普瑞巴林抗體，可用于各種普瑞巴林類免疫分析法的研究，為普瑞巴林的檢測提供更加方便快速準確的途徑。

1.一種普瑞巴林人工抗原的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1) 制備人工半抗原：
(a) 將普瑞巴林與三氟乙酸酐以摩爾比為1:1.5加入單口圓底燒瓶中，用苯做溶劑，加
入攪拌子，用冰浴冷卻到0℃，攪拌至固體完全溶解；然后撤去冰浴，室溫攪拌反應1小時；將
反應液轉入78℃油浴中回流反應3小時；
(b) 反應結束，將反應液冷卻至室溫，用旋轉蒸發儀減壓蒸干溶劑，得到淡黃色油狀物
即普瑞巴林人工半抗原；
(2) 制備普瑞巴林人工抗原：
(c) 將普瑞巴林半抗原與N-羥基琥珀酰亞胺、環己基碳酰二亞胺以摩爾比為1:1.5:
1.5溶于N,N-二甲基甲酰胺中，室溫攪拌反應18小時，反應結束后離心取上清液記為A液；
(d) 將氯化鈉與十二水磷酸氫二鈉、二水磷酸二氫鈉以摩爾比為78.3:4.2:1溶于雙蒸
水中，制備鈉離子濃度為0.1mol/L的PBS緩沖液，pH為7.2~7.4；
(e) 將牛血清蛋白溶于PBS緩沖液中，得到濃度為5mg/ml的B液；
(f) 將A液緩慢滴加到B液，A液與B液的體積比為1:5，得到的混合液在4℃條件下靜置
保存過夜，得到人工抗原混合液；
(g) 配置0.5%的Na₂CO₃水溶液5L，并用2N的NaOH水溶液調PH=12，作為堿性透析液；將步
驟（f）所得人工抗原混合液裝入透析袋，攪拌條件下，在堿性透析液中透析；
(h) 將堿性透析過的人工抗原混合液于PBS緩沖液中透析，透析結束后離心取上清液
即得到人工抗原：普瑞巴林-牛血清蛋白。