1.經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株包含對下述靶基因的遺傳修飾，所述靶
基因編碼：a)乙酸激酶ackA，b)乳酸脫氫酶的ldhA，c)醇脫氫酶adhE，d)丙酮酸-甲酸裂解酶
pflB，e)甲酸轉運蛋白focA，f)甲基乙二醛合酶mgsA，所述遺傳修飾使所述靶基因編碼的多
肽的酶活性失活，并且所述大腸桿菌菌株過表達磷酸烯醇丙酮酸羧激酶pck，其中所述大腸
桿菌菌株產生至少200mM琥珀酸。
2.權利要求1的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述大腸桿菌菌株還包含對編碼丙
酮酸氧化酶的靶基因的遺傳修飾，并且所述遺傳修飾使所述基因編碼的多肽的酶活性失
活。
3.權利要求1的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述大腸桿菌菌株還包含對下述靶
基因的遺傳修飾，所述靶基因編碼a)丙酮酸氧化酶，b)丙酸激酶和c)α-酮丁酸甲酸裂解酶，
并且所述遺傳修飾使所述靶基因的多肽的酶活性失活。
4.權利要求1的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述大腸桿菌菌株還包含對下述靶
基因的遺傳修飾：所述靶基因編碼a)丙酮酸氧化酶，b)丙酸激酶，c)α-酮丁酸甲酸裂解酶和
d)檸檬酸裂解酶，并且所述遺傳修飾使所述靶基因的多肽的酶活性失活。
5.權利要求1的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述大腸桿菌菌株還包含對下述靶
基因的遺傳修飾：所述靶基因編碼a)丙酮酸氧化酶，b)丙酸激酶，c)α-酮丁酸甲酸裂解酶，
d)檸檬酸裂解酶和e)天冬氨酸轉氨酶和f)蘋果酸酶，并且所述遺傳修飾使所述靶基因的多
肽的酶活性失活。
6.權利要求1的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述大腸桿菌菌株還包含對下述靶
基因的遺傳修飾：所述靶基因編碼a)丙酮酸氧化酶，b)天冬氨酸轉氨酶，c)蘋果酸酶，d)丙
酸激酶，e)α-酮丁酸甲酸裂解酶，f)檸檬酸裂解酶和g)磷酸乙酰轉移酶，并且所述遺傳修飾
使所述靶基因的多肽的酶活性失活。
7.權利要求1-6中任一項的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中通過缺失、移碼突變、點
突變、插入終止密碼子或其組合使所述基因或其部分、或靶基因或其部分失活。
8.權利要求1-6中任一項的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述經遺傳修飾的大腸
桿菌菌株不具有外源基因或其片段或僅具有天然基因。
9.權利要求1-6中任一項的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，條件是：1)所述經遺傳修飾的
大腸桿菌菌株中一個或多個以下的酶未被失活：a)延胡索酸還原酶；b)ATP合酶；c)2-酮戊
二酸脫氫酶；d)琥珀酸脫氫酶；e)異檸檬酸裂合酶阻抑物；和/或2)所述經遺傳修飾的菌株
不含有編碼和/或過表達蘋果酸脫氫酶、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、丙酮酸羧化酶和/或檸檬
酸合酶的質粒。
10.權利要求9的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述質粒是多拷貝質粒。
11.權利要求1-6中任一項的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述遺傳修飾的大腸桿
菌菌株是經代謝演化的。
12.生產琥珀酸的方法，該方法包括在培養基中培養一種或者多種權利要求1-6中任一
項的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，所述培養基包含2％至20％w/v的碳水化合物，所述碳水
化合物是葡萄糖、果糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、蔗糖、纖維二糖、半纖維素
或其組合。
13.權利要求12的方法，其中琥珀酸的產率大于或等于90％。
14.權利要求12或13的方法，其中所述培養基包含甘油作為底物用于生產琥珀酸。
15.權利要求2的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，所述菌株還包含對下述基因的遺傳修
飾，所述基因編碼丙酸激酶和α-酮丁酸甲酸裂解酶，所述遺傳修飾失活由所述基因產生的
多肽的酶活性，其中所述菌株的相關特征是ΔmgsA,ΔpoxB,ΔackA::翻譯終止序列,Δ
adhE,ΔldhA,Δ(focA-pflB),ΔtdcDE。
16.權利要求15的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株還包含對編碼檸檬酸裂
解酶的基因的遺傳修飾，所述遺傳修飾使所述基因編碼的多肽的酶活性失活。
17.權利要求16的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株還包含編碼蘋果酸酶的
基因的遺傳修飾，所述遺傳修飾使所述基因產生的多肽的酶活性失活。
18.權利要求16的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株還包含編碼天冬氨酸轉
氨酶的基因的遺傳修飾，所述遺傳修飾使所述基因產生的多肽的酶活性失活。
19.權利要求18的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株還包含編碼蘋果酸酶的
基因的遺傳修飾，所述遺傳修飾使所述基因產生的多肽的酶活性失活。
20.權利要求19的經遺傳修飾的大腸桿菌菌株，其中所述菌株還包含編碼磷酸乙酰轉
移酶的基因的遺傳修飾，所述遺傳修飾使所述基因產生的多肽的酶活性失活。
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