本發明提出了一種保健酒中總皂苷含量的測定方法，包括以下步驟：S1校準溶液的制備和顯色，S2酒樣溶液的制備和顯色，以及S3酒樣中總皂苷的含量計算。其中S1校準溶液的制備和顯色，S2酒樣溶液的制備和顯色操作過程中，首先將皂苷水解成苷元，消除了糖基對香草醛顯色劑的干擾，采用液液萃取方式提取苷元的同時除去了酒樣中的干擾色素。本發明方法具有線性關系良好、準確度高、精確度好、重復性效果良好等優點，因此非常適合用于保健酒中總皂苷含量的定量分析和質量控制。

1.一種保健酒中總皂苷含量的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1：校準溶液的制備和顯色
S101水解：往乙腈和鹽酸的混合溶劑中加入人參皂苷Re甲醇溶液，混勻后于恒溫水浴
條件下進行水解；
S102萃取：水解產物冷卻后加入二氯甲烷和去離子水，水洗分離去掉水層，經氮吹儀吹
干有機相層；
S103校準溶液配制：將萃取吹干后的產物用乙腈溶解和定容，得到人參皂苷苷元校準
溶液；
S104測定吸光度：取人參皂苷苷元校準溶液加入到香草醛硫酸顯色中間溶液中，顯色
體系中人參皂苷苷元校準溶液的濃度記為C_標，測定人參皂苷苷元校準溶液的吸光度值，該
吸光度值記為A_標；
S2：酒樣溶液的制備和顯色
S201皂苷的提取：將保健酒酒樣揮干乙醇和水，所得固體用水溶解，將該溶液進行固相
萃取和洗脫，收集洗脫液，除去溶劑，所得固體用甲醇溶解，獲得酒樣皂苷甲醇溶液；
S202水解：往乙腈和鹽酸的混合溶劑中加入酒樣皂苷甲醇溶液，混勻后于恒溫水浴條
件下進行水解；
S203萃取：將水解產物冷卻后加入二氯甲烷和去離子水，水洗分離去掉水層，經氮吹儀
吹干有機相層；
S204酒樣溶液的配制：將萃取吹干后的產物用乙腈溶解并定容至V₁mL，得到酒樣苷元乙
腈溶液；
S205測定吸光度：吸取V₂mL酒樣苷元乙腈溶液加入到V₃mL的香草醛硫酸顯色中間溶液
中，測定酒樣苷元乙腈溶液的吸光度，該吸光度值記為A_樣；
S3：酒樣中總皂苷的含量計算
計算公式為：

式中，X表示酒樣中總皂苷的含量，單位為mg/100mL；A_標表示紫外分光光度計測定的校
準溶液的吸光度值；A_樣表示紫外分光光度計測定的樣品吸光度值；C_標表示顯色體系中校準
溶液的濃度，單位為μg/mL；946.55為人參皂苷Re的摩爾分子量，單位為g/mol；476.73為人
參皂苷水解成苷元的摩爾分子量，單位為g/mol；
步驟S101和S202的水解過程中，恒溫水浴溫度為80℃，時間為3小時；
步驟S101和S202的水解過程中，乙腈和鹽酸的體積比為1:1；
其中，所述步驟S104的測定吸光度過程中，取人參皂苷苷元校準溶液加入到香草醛硫
酸顯色中間溶液中，混勻得到校準顯色組；同時吸取乙腈加入到香草醛硫酸顯色中間溶液
中，混勻得到溶劑空白顯色組；所得校準顯色組和溶劑空白顯色組于70℃水浴加熱10分鐘
后迅速放入冰水中冷卻，后檢測溶液在最大吸收波長下的吸光度值；
所述步驟S201皂苷的提取過程中，將保健酒酒樣水浴揮干乙醇和水，所得固體用水溶
解，將該溶液加入經激活的萃取小柱中萃取，然后用去離子水洗滌，保持1～2滴/秒的速度
洗滌，再分別用70％甲醇水溶液和甲醇進行洗脫，收集洗脫液，除去甲醇和水，所得固體用
甲醇溶解，獲得酒樣皂苷甲醇溶液；
所述步驟S205的測定吸光度過程中，取酒樣苷元乙腈溶液加入到的香草醛硫酸顯色中
間溶液中，混合均勻，所得混合物于70℃水浴加熱10分鐘后迅速放入冰水中冷卻，后檢測溶
液在最大吸收波長下的吸光度值。
2.根據權利要求1所述的保健酒中總皂苷含量的測定方法，其特征在于，步驟S101和
S202的水解過程中使用的鹽酸還可以用硫酸或硝酸代替。
3.根據權利要求1或2所述的保健酒中總皂苷含量的測定方法，其特征在于，測定過程
中所使用到的甲醇還可以替換為水飽和正丁醇。